Arp2/3復(fù)合物抑制劑（CK-636）

Arp2/3復(fù)合物抑制劑（CK-636）公司*的產(chǎn)品：PAK2 /FITC 熒光標(biāo)記p21激活激2抗體IgG
Phospho-PAK2 (Ser20) /FITC 熒光標(biāo)記化p21激活激2抗體IgG
PAK4/FITC 熒光標(biāo)記p21激活激4抗體IgG
Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) /FITC 熒光標(biāo)記化p21激活

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Arp2/3復(fù)合物抑制劑（CK-636）

英文名稱：CK-636

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

布魯氏菌 生物Ⅱ型封閉用正常小鼠血清（原液）Escherichia coli小鼠水通道蛋白1(AQP-1)

枯草芽胞桿菌枯草亞種多聚賴(10×防脫片劑)Escherichia coli小鼠水通道蛋白0(AQP-0)

糙孢曲霉磷鹽緩沖液(0.01M pH7.4)（干粉包）Escherichia coli小鼠水通道蛋白0(AQP-0)

畢赤酵母蓋玻片Escherichia coli小鼠水通道蛋白2(AQP-2)

膠孢塑料切片盒Escherichia coli小鼠水通道蛋白2(AQP-2)

鏈霉菌三羥甲基烷Escherichia coli小鼠甲狀腺球蛋白(TG)

變異鏈球菌不銹鋼染色架Escherichia coli小鼠甲狀腺球蛋白(TG)

嗜中溫寒冷桿菌30%烯酰Escherichia coli小鼠抑制A(INH-A)

木克酵母屬寬范圍預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(20-120kDa)/6條帶Escherichia coli小鼠抑制A(INH-A)

馬里努斯咸海鮮球菌低范圍預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-116kDa)/7條帶Escherichia coli小鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)

酒色青霉預(yù)染寬范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-170kDa)/10條帶Escherichia coli小鼠絨毛膜促性腺激β(β-CG)

新城疫病次高蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(43-200kDa)/5條帶Escherichia coli小鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)

釀酒酵母預(yù)染彩色高范圍蛋白質(zhì)分子量Marker（10-260kDa）/10條帶Escherichia coli小鼠性激結(jié)合球蛋白(SHBG)

石泉鹽單胞菌預(yù)染次高蛋白分子量Marker（43-200kDa)/5條帶Escherichia coli小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)

植物乳桿菌Western Blot ECL超敏發(fā)光液(A液12.5ml、B液12.5ml)Escherichia coli小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)

巴斯德畢赤酵母KODAK膠片Escherichia coli小鼠脫氫表雄(DHEA)

神經(jīng)毒性因子ICP34.5人單純皰疹Ⅰ型抗體肉色香蘑人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞

核因子1A抗體煙管菌人肝卵圓細(xì)胞

1號染色體開放閱讀框63抗體半球蓋田頭菇大鼠正常胃黏膜上皮細(xì)胞

腎小球細(xì)胞粘附分子受體抗體琥珀乳牛肝菌人包皮成纖維細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）
Arp2/3復(fù)合物抑制劑（CK-636）少根根霉 小檗

球孢白僵 3-(環(huán)己氨基)-1-磺酸鈉鹽

靈芝 芹菜苷

谷棒桿 3-(環(huán)己氨基)2-羥基-1-磺酸鈉鹽

產(chǎn)紫青霉 7-乙基-10羥基

茄爾氏 3-(環(huán)己氨基)2-羥基-1-磺酸

大孢鏈霉 3-(環(huán)己氨基)-1-磺酸

腸球?qū)?/span> 葒草-2"-0-苷

直絲紫鏈霉 三羥甲基氨烷乙酸鹽

地絲雙足囊 谷單鈉鹽

小孢根霉須狀變種 三羥甲基氨烷鹽酸鹽

枯草芽孢桿枯草亞種 鵝去氧膽酸

紫紅紅球 雙[三（羥甲基）氨基烷]

死亡谷芽孢桿 脫氧膽酸鈉（牛）

黑木耳 雙[三（羥甲基）氨烷]