MELK抑制劑

MELK抑制劑公司*的產(chǎn)品：Human Enterovirus ELISA Kit 人腸病11－反－十八烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
Human echinococcus antibody IgG ELISA Kit 人包蟲抗體IgG叔丁 Standard for GC, ≥99.9% (GC)
PT(Human Pertussiu Toxin) ELISA Kit 人百日咳叔丁 >99%

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MELK抑制劑

英文名稱：OTSSP167 hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

強(qiáng)雄腐霉SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體Human TPO(Thrombopoietin) ELISA Kit肌紅蛋白(MYO/MB)

假蜜環(huán)菌轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體Human LH(Luteinizing Hormone) ELISA Kit肌紅蛋白(MB)

血紅鞘鞍單胞菌NPIP樣蛋白1抗體Human TSH(Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit肌酐(Cr)

黑曲霉老年性癡呆蛋白APH2抗體Human Surv(Survivin) ELISA Kit肌鈣蛋白T(Tn-T)

乳粉  三聚神經(jīng)凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1抗體（前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9）Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)

根瘤菌G蛋白偶聯(lián)受體147抗體Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)

土味鏈霉菌孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit饑餓激(GHRL)

微小桿菌磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit活性氧(ROS)

構(gòu)巢曲霉核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit活化受體樣激1(ALK1)

釀酒酵母谷受體2C抗體Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit活化A(ACV-A)

聚生殼菌酪激B抗體Human REN(Renin) ELISA Kit活化凝血因子X(FXa)

雜色曲霉NADPH氧化4抗體Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)

無核分布基因E同源蛋白1抗體Human PD-1/PDCD1(Programmed Cell Death Protein 1) ELISA Kit活化蛋白C抵抗(APCR)

大腸埃希氏桿菌絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human POSTN/OSF2(Periostin) ELISA Kit活化蛋白C(APC)

釀酒酵母磷化絲/蘇蛋白激NEK9抗體Human PRL(Prolactin) ELISA Kit混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)

黑白輪枝孢多調(diào)控因子1抗體Human PRSS8(Prostasin) ELISA Kit混合淋巴反應(yīng)封閉因子(MLR-Bf)

極單胞菌Polaromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR白藜蘆

: GIM3.220資源名稱: 華根霉 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR阿魏

茯苓Poria│cocos 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品二氫楊梅
MELK抑制劑魯氏接合酵母 脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養(yǎng)基白介8Elisa

酮叢毛單胞 沙氏葡萄糖瓊脂（含霉）白介23Elisa

總狀共頭霉 瓊脂培養(yǎng)基B乙型肝炎病表面抗原Elisa

釀酒酵母 YEP培養(yǎng)基乙型肝炎E抗原Elisa

葡萄盤孢 Slanetz和Bartley培養(yǎng)基甲狀旁腺Elisa

淡紫擬青霉 NAC瓊脂培養(yǎng)基降鈣Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 NAC液體培養(yǎng)基25羥基維生DElisa

曲霉 SPYE肉湯骨特異性堿性磷酸Elisa

葡萄汁有孢漢遜酵母 FS培養(yǎng)基球蛋白AElisa

釀酒酵母 梭強(qiáng)化培養(yǎng)基球蛋白GElisa

栗疫 酸化MRS瓊脂（AMRSA）球蛋白MElisa

鏈球(不定種) 酸化MRS瓊脂（AMRSA）褪黑Elisa

華麗黃鏈霉 瓊脂培養(yǎng)基K(XLD瓊脂)皮質(zhì)Elisa

枯草芽孢桿 乳糖肉湯培養(yǎng)基睪酮Elisa

褐革 α-D-(+)-塔羅糖孕酮Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)