商品介紹:
AX20017是蛋白激酶G(PknG)的小分子抑制劑,IC50值為0.39μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):329221-38-7 純度:99.85% 分子量:264.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PknG抑制劑(AX20017)
英文名稱:AX20017
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
冬凌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Broussonetine A alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27抗體包裝100mg
冬青苷D英文名稱: Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白81抗體包裝500mg
豆腐果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sapindoside AGamma干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體包裝1g
豆甾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cabozantinib (S)-malate(BMS907351-(S)-malate)異檸檬脫氫3 beta亞基抗體包裝5g
豆甾葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Presapogenin CP4干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體包裝25g
胡蘿卜英文名稱: 12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate異檸檬脫氫gamma亞基抗體包裝5g
獨(dú)活(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phorbol 12-myristate 13-acetateBipped B樣蛋白抗體包裝25g
味(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gambogic acid艾杜糖-2-硫酯抗體包裝5g
杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: schisanhenol α-L-艾杜糖苷抗體包裝100g
杜仲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白122抗體包裝1g
杜仲葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bupivacaine base纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白140抗體包裝25g
短葶山麥冬皂苷C英文名稱: Bupivacaine base纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20抗體包裝5g
短葶山麥冬皂苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cinepazide maleate纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體包裝1g
短葉松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cinepazide maleate纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體包裝5g
斷血流皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium sulfadiazine(SD-Na)CD101抗體包裝100g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR柯薩奇病試劑盒胡黃連苷Ⅰ;PicrosideⅠ
: =ATCC21749資源名稱: 尿氧化節(jié)桿菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品柯薩奇病試劑盒黃杞苷;Emgelitin
不動(dòng)桿菌Acinetobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR抗組織轉(zhuǎn)谷酰試劑盒和厚樸酚;Honokiol
PknG抑制劑(AX20017)原癌因WIP1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(RG)Human, Mouse, Rat
信號(hào)通路Wnt2B抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
WEE1蛋白抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(1mg/1mL IN HEXANE)(SH)(PLEASE CALL)Human, Mouse
WRCH1抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(SH)Human, Mouse
絲/蘇激家族成員的因WNK3抗體隱黃質(zhì) CRYPTOXANTHIN, B-(ST)(PLEASE CALL)Human, Mouse
信號(hào)通路Wnt9a抗體姜黃 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human
Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體姜黃 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human, Mouse
WASP結(jié)合蛋白抗體姜黃 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human
野生型P53誘導(dǎo)因1抗體姜黃 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable)Human