H+/K+,ATPase抑制劑(TAK-438 free base)

H+/K+,ATPase抑制劑(TAK-438 free base)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-GRP78/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC 熒光素標(biāo)記核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

鹽拉貝洛爾（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： trans-Zeatin脫氫/還原家族成員2抗體包裝1g

鹽雷莫司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dipotassium tetrachloroplatinate牙本質(zhì)磷蛋白抗體包裝25g

鹽雷尼替?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CycloastragenolDermokine β蛋白抗體包裝5g

鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aristolochic acid ADPCR1蛋白抗體包裝25g

鹽利托君(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Purpurin表皮源性蛋白6抗體包裝5g

鹽林可霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Jujuboside D雙特異性蛋白磷7抗體包裝1g

鹽硫必利（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pseduoprotodioscin雙特異性蛋白磷26抗體（絲裂原活化蛋白激磷8）包裝5g

鹽硫利達(dá)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxypaeoniflorin阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體包裝1mg

鹽魯拉西(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 3-isomangostinS期激活化蛋白DBF4A抗體包裝1g

那林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Naringin dihydrochalcone著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Hygromycin B雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體包裝250mg

己定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Apiin 神經(jīng)干樹(shù)突調(diào)節(jié)蛋白DAGLα抗體包裝25g

米帕明/咪（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Chrysoeriol 7-O-glucoside對(duì)接蛋白4抗體包裝5g

丁（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Kaempferol-3-O-rutinosideDULLARD蛋白抗體包裝100g

普魯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pantoprazole Sodium絲/蘇蛋白激MNB抗體包裝25g

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR銅鋅-過(guò)氧化物岐化試劑盒三十烷;1-Triacontanol

炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品銅藍(lán)蛋白試劑盒雙去氧基姜黃;Bisdemethoxy

: JCM13192=CIP109020=KCTC22434=NBRC101534=NRRLB-41137資源名稱: Gramellaportivictoriae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR同源框A3試劑盒薯蕷皂苷;Dioscin
H+/K+,ATPase抑制劑(TAK-438 free base)小鼠小扁豆結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1桔梗皂苷元Human, Mouse

人CC趨化因子受體1桔梗皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷Human, Mouse, Rat

魚(yú)類皮質(zhì)桔紅;桔皮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

大鼠CD8分子菊花（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

人CX3C趨化因子受體1菊苣（毛菊苣）（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

魚(yú)類超敏C反應(yīng)蛋白菊苣Human

兔核因子κB受體活化因子配菊苣（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

小鼠高鐵血紅蛋白橘葉（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白巨大戟(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat