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詳細(xì)介紹
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
400ml | 1～3天 |
商品介紹：
細(xì)胞中的細(xì)胞核是由酸性物質(zhì)組成，它與堿性染料的親和力較強(qiáng)；而細(xì)胞漿則相反，它含有堿性物質(zhì)和酸性染料的親和力較大。巴氏染色液利用這一特性對細(xì)胞進(jìn)行多色性染色，細(xì)胞經(jīng)染色后能清晰地顯示細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，胞質(zhì)透亮鮮麗，各種顆粒分明，細(xì)胞核染色質(zhì)非常清楚，從而較容易發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。通過巴氏染色可反映出細(xì)胞在炎癥刺激下和癌變后的形態(tài)學(xué)變化，對早期發(fā)現(xiàn)和診斷一些病變和腫瘤具有較重要意義。 巴氏染色法是臨床細(xì)胞學(xué)檢查常用的傳統(tǒng)染色方法，在婦科檢查中，巴氏染色細(xì)胞學(xué)檢查是宮頸癌及癌前病變的較常用篩查方法。同時(shí)巴氏染色還可觀察女性激素水平和檢測生殖道病原體如念珠菌、滴蟲等的感染。其中EA50染液為EA36的改良型，其操作方法與EA36相同。一般認(rèn)為，EA36和EA50 較適用于婦科標(biāo)本，改良EA65染液較常用于非婦科標(biāo)本(如胸、腹水等脫落細(xì)胞)。 儲存條件：室溫密封保存。 有效期：六個(gè)月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
胡椒(白胡椒)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl ricinoleate磷化脂肪型脂肪結(jié)合蛋白包裝5g
胡椒(黑胡椒)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Methyl behenate脂肪結(jié)合蛋白12抗體包裝1g
胡椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Methyl tetracosanoate四連接同源蛋白FJX1抗體包裝5g
胡蘿卜苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Methyl cis-13-docosenoateG蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體包裝1g
胡麻屬苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nonadecanoic AcidG蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體包裝25g
湖北貝母（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oleic acidG蛋白結(jié)合蛋白α13/Gα13抗體包裝5g
葫蘆巴（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： trans-9-Octadecenoic methyl esterG蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體包裝100mg
葫蘆巴堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Para RedG蛋白α抑制劑抗體包裝100g
葫蘆巴堿鹽鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Petroselinic acidG蛋白受體α x+z抗體包裝25g
葫蘆A英文名稱： D-Panthenol半乳糖神經(jīng)?？贵w包裝500g
葫蘆B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Saccharin sodium salt solution磷化葡萄糖合成1抗體包裝100ml
葫蘆D;葫蘆苦D英文名稱： γ-Undecanolactone半乳糖凝集3抗體包裝25ml
葫蘆E（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Undecanone生長因子受體結(jié)合蛋白7抗體包裝1g
槲寄生（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2′-Deoxycytidine hydrochloride糖基轉(zhuǎn)移1結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g
槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ammonium phosphatedi basicG蛋白偶聯(lián)受體LGR7蛋白抗體包裝1g
高溫放線菌屬Thermoactinomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR絨毛膜促性腺激試劑盒普拉洛芬;Pranoprofen
藻瑚菌Multiclavula│mucida (Pers.) R.H. Petersen 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品相關(guān)血漿蛋白A試劑盒派利文堿;Perivine
安卡紅曲Monascus│anka 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,BR特異性蛋白B試劑盒霹靂蘿芙木堿;Perakine
巴氏染色試劑盒(EA36)紫皮蘑 艾沙康挫α-黑Elisa
樊氏鹽單胞 5-甲基吡啶-2-酸紅富鐵Elisa
芽胞桿 Lys-Tyr-Lys acetate salt干擾誘導(dǎo)蛋白35kDaElisa
小弧 2-溴-3-甲氧基吡啶磷酸化蛋白激CElisa
矮棒曲霉 Octadecyl 4-chlorobenzenesulfonate [Octadecyl p-ch磷酸化蛋白激CElisa
擬青霉 4-溴-2-甲磷酯CElisa
橙黃硬皮馬勃 乙酰酮酸二(2-苯基吡啶)銥單氧化AElisa
短柄帚霉 麥芽三糖單氧化BElisa
大腸埃希 Phallacidin from Amanita phalloides成纖維生長因子9Elisa
韓國梅奇酵母 N-丁基芐ADP-核糖基轉(zhuǎn)移Elisa
美味側(cè)耳 Phallacidin from Amanita phalloides完整的成纖維生長因子23Elisa
平菇—CCEF89 2',7'-Difluorofluorescein成纖維生長因子23的C端裂解片段Elisa
稻黑孢 6-ROX [6-Carboxy-X-Rhodamine]心房利鈉肽Elisa
扣囊復(fù)膜孢酵母 Methyl 3,5-diformyl-1-indolizinecarboxylate組蛋白去甲基化Elisa
金黃殼囊孢 煙酸芐酯鞘氨激1Elisa
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