商品介紹:
XY1是SGC707的一種類似物(SGC707是一種有效的,選擇性PRMT3抑制劑,IC50值為31nM),但XY1對PRMT3*無活性的。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1624117-53-8 分子量:297.35 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PRMT3抑制劑(XY1) | XY1 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠組蛋白脫乙?;?/span>1(HDAC1)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit
山羊白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin10,IL-10ELISAKit 96T/48T
犬胰蛋白酶(ypsin)免疫試劑盒 Canine ypsin ELISA Kit
英文名稱MouseSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit小鼠5-羥色氨(5-HT)規(guī)格:96T/48T
差異相減雜交試劑盒10次
Ratfreefattyacids,FFAELISA試劑盒大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-27 ELISA Kit
大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA檢測試劑盒RatEpithelial-Cadherin,E-CadELISAKit 96T/48T
人Toll樣受體5(TLR5)免疫試劑盒 Human TLR5 ELISA Kit
英文名稱MouseCPAFELISAKIT小鼠沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格:96T/48T
10鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌5X200微升
rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA試劑盒兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human activin A (Activin-A) ELISA Kit 人活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒
RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANX-V(MouseannexinV)ELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ規(guī)格:48T/96T
血小板相關(guān)性抗體(PAIgG)細(xì)胞流式儀檢測試劑盒10次
PorcineIerferonγ,IFN-γELISAKit豬γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PRMT3抑制劑(XY1)pan 14-3-3 英文名稱: 14-3-3蛋白抗體 0.2ml
EMP3 英文名稱: 上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體 0.2ml
核因子2相關(guān)因子2抗體 Anti-Nrf2 0.1ml
Anti-SLK/Fyn/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p107/RBL1(Ser975) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 規(guī)格 0.1ml
Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg