解旋酶FANCJ和DinG抑制劑

解旋酶FANCJ和DinG抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC 熒光素標(biāo)記核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-monkey IgG/Biotin 生物素化兔抗猴IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
間隙連接蛋白43抗

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)Candida sake

大腸埃希菌Candida sake

豬鏈球菌Pichia ohmeri

膠孢Pichia ohmeri

枯草芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae

直絲淡紫灰鏈霉菌Schizosaccharomyces pombe

海水紅色桿菌Saccharomyces cerevisiae

彎孢節(jié)叢孢Trichosporon cutaneum

釀酒酵母Candida fermentati

SphingobiumCandida fermentati

類(lèi)干酪乳桿菌Pichia nakasei

費(fèi)氏中華根瘤菌Candida inconspicua

四生球菌屬Pichia membranifaciens

烯霉鏈霉菌Candida guilliermondii

異常漢遜酵母異常變種Pichia guilliermondii

豌豆根瘤菌*Pichia ohmeri

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)免疫試劑盒磷化腎上腺能受體β2抗體人原激活肽(TAP)ELISA 硫阿托品

小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)免疫試劑盒磷化水通道蛋白2抗體人原激活肽(TAP)ELISA 硫基葡萄糖

小鼠可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 免疫試劑盒磷化自噬相關(guān)蛋白3抗體人α1性糖蛋白(α1-AGP)硫長(zhǎng)春堿

小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)免疫試劑盒縮2抗體人α1性糖蛋白(α1-AGP)硫長(zhǎng)春新堿
解旋酶FANCJ和DinG抑制劑phospho-SYN1(Ser603) 英文名稱(chēng)： 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml

phospho-Ephrin B (Tyr329) 英文名稱(chēng)： 磷酸化Ephrin B抗體 0.1ml

新型抑癌基因抗體 Anti-TBX2 0.1ml

Anti-TLK1/FITC 熒光素標(biāo)記調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-LKB1(Ser428) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

NR2B (Glutamate receptor) 谷氨酸受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg