PIKfyve抑制劑(APY0201)

PIKfyve抑制劑(APY0201)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-GDF-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗生長、分化因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NRSF/REST/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)元抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BMPR2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

假黃單胞菌屬癌胚抗原單克抗體（檢測(cè)）Human CREB3L2 ELISA Kit山羊腦啡肽(ENK)免疫試劑盒

凍土毛霉癌基因c-Raf抗體Human CREST ELISA Kit山羊免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

兩歧雙歧桿菌Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human CREB1 ELISA Kit山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

球形節(jié)桿菌黑色瘤相關(guān)抗原抗體Human Claudin 7 ELISA Kit山羊免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

黃孢紫紅菇CD33抗體Human CREB3L2 ELISA Kit山羊粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒

希瓦氏菌*睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊口蹄疫抗體(FMDV IgM)免疫試劑盒

釀酒酵母CD7抗體Human CKS2 ELISA Kit山羊(Cortisone)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊抗利尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒

短芽孢桿菌CD68抗體Human CEP55 ELISA Kit山羊結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒

東方伊薩酵母緊密連接蛋白1抗體Human CD94 ELISA Kit山羊堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒

尖孢鐮刀菌膜輔蛋白抗體Human  CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊甲狀腺(T4)免疫試劑盒

委內(nèi)瑞拉鏈霉菌CXC趨化因子16抗體Human CEP63 ELISA Kit山羊甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒

新疆鹽地桿菌色c氧化IV亞型1抗體Human CEP350 ELISA Kit山羊黃體生成(LH)免疫試劑盒

球孢枝孢1號(hào)染色體開放閱讀框227抗體Human CDC14B ELISA Kit山羊氧化(XOD)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌2號(hào)染色體開放閱讀框71抗體Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊還原型谷胱甘肽(GSH)免疫試劑盒

淡青鏈霉菌質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Human CEP44 ELISA Kit山羊過氧化氫(CAT)免疫試劑盒

酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRp物質(zhì)試劑盒雷公藤次堿

木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRP鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白試劑盒羅漢松樹脂酚

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRProminin 2試劑盒雷公藤定堿
PIKfyve抑制劑(APY0201)馬來阿扎他啶英文名稱： LHRH (4-10)磷變位1抗體包裝1g

馬來非尼拉敏英文名稱： Lymphocyte Activating Pentapeptide磷激1抗體包裝5g

馬來吡汀英文名稱： Melittin(Mellitin)羧化抗體包裝1g

馬來伏沙明英文名稱： Metamorphosin A脫氫復(fù)合物X蛋白抗體包裝5g

馬來那敏/撲爾敏英文名稱： Neo-Kyotorphin磷烯羧激抗體包裝100g

馬來溴那敏英文名稱： Neurokinin A (4-10)果糖-2,6-二磷1抗體包裝25g

嗎貝英文名稱： Neuropeptide W-30 (human)磷化6磷果糖激抗體包裝1g

美芬諾英文名稱： Neuropeptide W-30 (rat)p21蛋白抗體包裝5g

英文名稱： Neurotensin (1-8)P選擇糖蛋白配體1抗體包裝25g

孟魯司特鈉英文名稱： Neuropeptide Y (13-36)(porcine)絲蛋白2抗體包裝5g

米爾貝肟英文名稱： Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)蛋白調(diào)解因子10抗體包裝10g

米拉貝英文名稱： Neuropeptide Y (22-36)香葉烯基轉(zhuǎn)移1β抗體包裝1g

米屈肼英文名稱： Neuropeptide Y (3-36)(porcine)胞漿蛋白LCP1抗體包裝100g

莫吉司坦英文名稱： Osteocalcin (7-19) (human)黑色瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體包裝25g

奈福泮/鹽平痛新英文名稱： Osteogenic Growth Peptide原鈣粘蛋白γA6抗體包裝5g