RIP2抑制劑（RIP2 kinase inhibitor 2）

RIP2抑制劑（RIP2 kinase inhibitor 2）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PAI-2/FITC 熒光素標(biāo)記纖溶酶原激活物抑制因子2抗體體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
mouse IgG/Biotin 生物素化小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 1ml
周期素H抗體 Anti-Cyclin H 0.2ml
Rabb

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

釀酒酵母Clostridium butyricum

釀酒酵母Clostridium butyricum

玫瑰皮黃鏈霉菌Paenibacillus polymyxa

淺灰鏈霉菌Paenibacillus polymyxa

軟毛青霉Lactobacillus rhamnosus

日勾維腸桿菌Lactobacillus rhamnosus

豌豆根瘤菌Lactobacillus plantarum

大腸埃希菌Lactobacillus plantarum

嗜熱鏈球菌Achromobacter denitrificans

高盧蜜環(huán)菌Enterobacter aerogenes

土壤節(jié)桿菌Azotobacter vinelandii

樹生酵母Azotobacter chroococcum

糞腸球菌Azotobacter agilis

針層孔菌屬Corynebacterium glutamicum

曲霉Azotobacter agilis

假諾氏菌Azotobacter chroococcum

豬口蹄疫抗體(IgM)免疫試劑盒防御α1/3抗體人白介1β (IL-1β)常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷

豬口蹄疫抗體(IgG)免疫試劑盒ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體人白介1β (IL-1β)常山乙

豬可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒植物延長蛋白（擬南芥）人表皮生長因子(EGF)朝藿定A

豬可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)免疫試劑盒A-Raf抗體人表皮生長因子(EGF)朝藿定A1
RIP2抑制劑（RIP2 kinase inhibitor 2）SLC6A19 英文名稱： 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體 0.1ml

eIF3F 英文名稱： 真核翻譯起始因子3F抗體 0.1ml

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3 Anti-VEGFR-3 0.1ml

Anti-TSARG6/FITC 熒光素標(biāo)記生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKKi/IKKe(Ser172) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 規(guī)格 0.1ml

TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉(zhuǎn)移生長因子–β2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg