商品介紹:
(R)-GNE-140是一種有效的LDHA抑制劑,對LDHA和LDHB的IC50值分別為3nM和5nM;(R)-GNE-140的活性是S型異構(gòu)體的18倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:2003234-63-5 純度:98.50% 分子量:499.04 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:LDHA抑制劑((R)-GNE-140)
英文名稱:(R)-GNE-140
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
小鼠脂肪酸合成酶(FASN)ELISA試劑盒 ,英文名: FASN ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T
人聚集蛋白(Agrin)免疫試劑盒 Human Agrin ELISA Kit
Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞TSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouse25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISA試劑盒小鼠25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T
人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)免疫試劑盒 human S100A9 ELISA Kit
英文名稱MouseuPARELISAkit小鼠尿激酶型血漿酶原激活因子受體(uPAR)規(guī)格:96T/48T
XTT比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500次
RabbitProgesterone,PROGELISA試劑盒兔子孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/OCN/BGP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human connective tissue growth factor (CTGF) ELISA Kit 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
PorcineHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAlpha-FodrinIgG/IgA(Humanai-alpha-FodrinIgG/IgA)ELISAKit人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA規(guī)格:48T/96T
血液精氨酸(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
Pisumsativumagglinin,PSAELISAKit豌豆凝集素(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
LDHA抑制劑((R)-GNE-140)SLC27A2 英文名稱: 長鏈脂肪酸A連接酶抗體 0.1ml
FSTL5 英文名稱: 卵泡抑素相關(guān)蛋白5抗體 0.2ml
黑素瘤抗原-1抗體 Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein 0.2ml
Anti-RRM1/FITC 熒光素標(biāo)記抗核糖核苷酸還原酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Pin1 (Ser16) 磷酸化肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體 規(guī)格 0.1ml
IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II ) 胰島素樣生長因子-II(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg