產(chǎn)品屬性:
中文名稱:I類HDAC抑制劑(Pimelic Diphenylamide 106)
英文名稱:Pimelic Diphenylamide 106
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Pimelic diphenylamide106是一種緩慢的,結(jié)合緊密的I類HDAC抑制劑(抑制HDAC1,2和3,IC50值分別150nM,760nM,和370nM),對II類HDAC沒有活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:937039-45-7 別名:RGFA-8;TC-H 106;Histone Deacetylase Inhibitor VII 分子量:339.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大蟬草Bacillus aquimaris
乳粉 蠟樣芽胞桿菌(定量)Bacillus aquimaris
麥根腐平臍蠕孢Micrococcus sp.
北京棒桿菌Micrococcus sp.
石莼海菌Bacillus sp.
莫氏菌屬Vibrio sp.
阿德長西氏酵母Vibrio sp.
氈毛栓孔菌Vibrio sp.
殼菌Bacillus firmus
香蔥鏈格孢菌Bacillus firmus
類干酪乳桿菌Halobacillus sp.
芽胞桿菌Halobacillus sp.
釀酒酵母Vibrio proteolyticus
山西黑粉菌Vibrio proteolyticus
羅倫隱球酵母Bacillus aquimaris
磚紅鐮孢Bacillus aquimaris
豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(SGLT1)免疫試劑盒整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)柴胡皂苷B2
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒內(nèi)收蛋白抗體人淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)柴胡皂苷C
豬內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體人α干擾(IFN-α)柴胡皂苷D
豬末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)免疫試劑盒脂聯(lián)受體1抗體人α干擾(IFN-α)柴胡皂苷F
I類HDAC抑制劑(Pimelic Diphenylamide 106)ZAN 英文名稱: 透明帶黏附蛋白ZAN抗體 0.2ml
DOCK1 英文名稱: 細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體 0.1ml
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Anti-phospho-ATF2 0.1ml
Anti-Annexin V/PE 熒光素PE標記兔抗人、大、小鼠、Annexin V抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格 0.1ml
phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)