mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)

mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)公司*的產(chǎn)品：BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit 人β732強苯烯陽離子交換樹脂 AR
FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit 人胎球蛋白A3-氨丁 98%
HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) ELISA Kit 人胎盤核糖

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)

英文名稱：OSI-027

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

矩圓黑盤孢腎結(jié)合蛋白抗體Anti-DKK2 Antibody載脂蛋白A2(APOA2)

科羅拉多擬無枝菌RET指蛋白樣2/3抗體Anti-DLD Antibody(PB0608)載脂蛋白A1(APOA1)

釀酒酵母RFESD蛋白抗體Anti-DLG1 Antibody(PB0592)甾-O-?；D(zhuǎn)移2(SOAT2)

灰色鏈霉菌灰色亞種胰島再生因子β抗體Anti-DLG4 Antibody甾-O-酰基轉(zhuǎn)移1(SOAT1)

莢膜紅細(xì)菌環(huán)指蛋白160抗體Anti-DLG3 Antibody運動因子相關(guān)蛋白1(MRP1)

微桿菌屬視黃脫氫13抗體Anti-DLG4 Antibody(PB0859)運動神經(jīng)元生存蛋白2(SMN2)

辣椒盤孢環(huán)指蛋白75抗體Anti-DLL1 Antibody孕烷X受體(PXR)

橙鱗傘8RIT1蛋白抗體Anti-DLL3 Antibody孕免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)

大腸埃希氏菌環(huán)指蛋白19B抗體Anti-DLL4 Antibody孕(Pg)

橙灰紫旋鏈霉菌胰島β生長因子抗體Anti-DMRT1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白4(TMOD4)

腸沙門氏菌腸亞種波恩血清型環(huán)指蛋白149抗體Anti-DNAJA2 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)

地衣芽孢桿菌心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體Anti-DMD Antibody(PB0292)原肌球調(diào)節(jié)蛋白2(TMOD2)

烏洛托品甲速測管環(huán)指蛋白180抗體Anti-DNAJA1 Antibody原肌球調(diào)節(jié)蛋白1(TMOD1)

茶藨子葡萄座腔菌環(huán)指蛋白123抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白4(TPM4)

弗雷德里克斯堡假單胞菌軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白3(TPM3)

豇豆慢生根瘤菌環(huán)指蛋白210抗體Anti-DNM1 Antibody原肌球蛋白2β(TPM2)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

: 205234資源名稱: 福氏志賀氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
mTORC1和mTORC2抑制劑(OSI-027)冷海水黃桿 2-氨基-3-神經(jīng)型一氧化氮合成Elisa

乳白居真細(xì) 酚紅葡萄糖肉湯偽狂犬病病GPI抗體Elisa

Paraburkholderia contaminans 硝酸鹽肉湯偽狂犬病GB抗體Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 代硅烷偽狂犬病GE抗體Elisa

雞傷寒沙門氏 動力-硝酸鹽培養(yǎng)基（A法）熱休克蛋白90Elisa

煙色紅曲霉 木糖-明膠培養(yǎng)基圓環(huán)病Elisa

乳酸克魯維酵母 (4S,4'S)-2,2'-(戊烷-3,3'-二基)雙(4-芐基-4,5-二氫惡唑)副豬嗜血桿Elisa

天花板節(jié)桿 4-芐溴非洲豬瘟Elisa

玫瑰小雙孢 4-苯基-1,2,4-三唑烷-3,5-二酮口蹄疫A型抗體Elisa

Leucostoma niveum 4-聯(lián)苯結(jié)蛋白Elisa

匿名曲霉 芐基溴化鎂圓環(huán)病2型抗體Elisa

大腸埃希氏 3-甲氧基-1-轉(zhuǎn)化生長因子Elisa

可可鏈霉可可亞種 4-氟苯基乙硫生長因子Elisa

生孢梭 檸檬酸酯清道夫受體Elisa

蘋果雙殼 5-基口蹄疫病IgA抗體Elisa