公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CDK7抑制劑(THZ1-R)
英文名稱:THZ1-R
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
THZ1-R是一種CDK7抑制劑,IC50值為146nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1621523-07-6 純度:98.30% 分子量:568.07 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
米曲霉黑色瘤硫軟骨蛋白多糖抗體Human IL-24(Interleukin 24) ELISA Kit核因子κB抑制物激β(IKK-β)
大豆慢生根瘤菌突觸粘附分子3抗體Human IL-27(Interleukin-27 subunit alpha) ELISA Kit核因子κB抑制物激α(IKK-α)
木拉克德克斯酵母跨膜硫軟骨蛋白聚糖C抗體Human IL-28A(Interleukin-28A) ELISA Kit核因子κB受體活化劑配體(RANKL)
大腸埃希氏菌噬菌體神經(jīng)腫瘤Nova1抗原抗體Human IL-29(Interleukin 29) ELISA Kit核因子κB(NF-κB)
球孢白僵菌B淋巴鏈接激活蛋白抗體Human IL-3(Interleukin 3) ELISA Kit核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)
嘴突凸臍蠕孢中性鞘磷脂2抗體Human IL-31(Interleukin-31) ELISA Kit核糖體蛋白S9(RPS9)
球毛殼*核受體蛋白NR2E1抗體Human IL-4(Interleukin 4) ELISA Kit核糖體蛋白S25(RPS25)
金黃桿菌屬神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2抗體Human IL-33(Interleukin-33) ELISA Kit核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)
枯草芽孢桿菌腦特異性蛋白BPX抗體Human IL-5(Interleukin 5) ELISA Kit核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)
鈉線菌屬核纖層蛋白A識別因子抗體Human IL-6R alpha(Interleukin-6 receptor subunit alpha) ELISA Kit核糖核(RNASE)
萎蔫短小桿菌NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體Human MDC(Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)
糙皮側(cè)耳神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體Human Mer/MERTK(Tyrosine-protein kinase Mer) ELISA Kit核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)
金龜子綠僵菌神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關(guān)蛋白)Human KLK6(Kallikrein-6) ELISA Kit核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)
稍黃鏈霉菌神經(jīng)連接蛋白2抗體Human C-ERC(Mesothelin) ELISA Kit核基質(zhì)蛋白22(NMP22)
戊糖乳桿菌NIPA樣蛋白3抗體Human PIM-1(Serine/Threonine-protein Kinase Pim-1) ELISA Kit核黃激(RFK)
枯草芽孢桿菌軸突生長誘導(dǎo)因子3抗體Human SERPINA4(Kallistatin) ELISA Kit和肽(copeptin)
團(tuán)青霉Penicillium│commune 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR綠原
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR秦皮乙
毛霉屬Mucor│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR秦皮
CDK7抑制劑(THZ1-R)分枝節(jié)桿 3-氟苯硫酚白介6Elisa
小毛克孢屬 pH7.6磷酸鹽緩沖液腫瘤壞死因子βElisa
畢赤酵母 pH6.8磷酸鹽緩沖液腫瘤壞死因子αElisa
根瘤 MMO-MUG培養(yǎng)基白介10Elisa
大腸埃希氏 聚(1,4-丁二丁二酸)酯鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白Elisa
黏液鞘氨單胞 N,O-雙(基硅烷基)三氟乙酰鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白IgG抗體Elisa
慢生根瘤 TPY肉湯瘦Elisa
黃色籃狀 TPY液體培養(yǎng)基腎上腺Elisa
蠟狀芽孢桿 豬支原體培養(yǎng)基促甲狀腺Elisa
釀酒酵母 N,O-雙(基硅烷基)三氟乙酰脂多糖Elisa
腸膜明串珠葡萄聚糖亞種 霉液體培養(yǎng)基1,25-二羥基維生D3Elisa
印度洋鏈霉 RS培養(yǎng)基(RS瓊脂平板)1-3-β-D葡聚糖Elisa
釀酒酵母 DKW培養(yǎng)基17-羥皮質(zhì)類固Elisa
韓國污泥單胞 GVC增液25羥基維生D3Elisa
黃溶鏈霉 BSSA培養(yǎng)基4-羥基壬烯Elisa