APC抑制劑(TAME)

APC抑制劑(TAME)公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-STAT1(pThr701)/FITC 熒光標(biāo)記抗化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgG
phospho-STAT3(pThr705)/FITC 熒光標(biāo)記抗化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgG
JNK2/FITC 熒光標(biāo)記氨末端激2抗體IgG
phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 熒光標(biāo)記抗化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

泡盛曲霉顯影液試劑Escherichia coli小鼠脫氫表雄(DHEA)

斑玉蕈（真姬菇、蟹味菇）定影液試劑Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)

鏈格孢菌萘染色試劑盒Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)

炭黑曲霉TMB 2HCl 3,3’5,5’-四甲基聯(lián)二鹽Escherichia coli小鼠內(nèi)皮脂肪(EL)

擬青霉硝纖維膜(NC膜；膜孔徑0.45um)Escherichia coli小鼠內(nèi)皮脂肪(EL)

元蘑特產(chǎn)1號(hào)PVDF膜/二氟化樹脂膜(膜孔徑:0.45um)Escherichia coli小鼠碳酐(CA)

啤酒酵母弗氏*佐劑（國(guó)SIGMA）Escherichia coli小鼠碳酐(CA)

鏈格孢屬弗氏不*佐劑（國(guó)SIGMA）Escherichia coli小鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)

殼菌超低范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(3.3-20.1kDa)/5條帶Escherichia coli小鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)

大腸埃希菌低范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-97.4KDa)/5條帶Escherichia coli小鼠胃動(dòng)(MTL)

茶褐斑盤多毛孢預(yù)染寬范圍蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)(19-117KD)/6條帶Escherichia coli小鼠胃動(dòng)(MTL)

葡萄座腔菌預(yù)染低范圍蛋白質(zhì)分子量Marker（14.4-97.4kDa）/6條帶Escherichia coli小鼠生長(zhǎng)抑(SS)

嗜熱脂肪地球芽胞桿菌10XMOPSEscherichia coli小鼠生長(zhǎng)抑(SS)

異常漢遜酵母超敏可逆型蛋白染色試劑盒Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)

大腸埃希氏桿菌可逆型蛋白轉(zhuǎn)移膜染色液Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)

廈門假單胞菌可逆型蛋白轉(zhuǎn)移膜染色液Escherichia coli小鼠血小板活化因子(PAF)

EGR1結(jié)合蛋白2抗體虎皮粘蓋牛肝菌豬小腸上皮細(xì)胞

NK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白B抗體粘蓋牛肝菌大鼠腎足細(xì)胞

心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體彩色豆馬勃轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞

核小體結(jié)合蛋白1抗體豹皮香菇小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克 14
APC抑制劑(TAME)火木層孔 一枝蒿甲

溜曲霉 十八烷基基化

食鳥噬冷 3-異酸酯基基氧基硅烷

樹脂枝孢霉 吳茱萸內(nèi)酯

巨大芽孢桿 聚季鹽-10

藤黃微球 土大黃苷

江晨節(jié)桿 囊酸

Kocuria halotolerans N-氨乙基-3-氨基二甲氧基硅烷

釀酒酵母 安五酯

土地桿 芐基基

麥芽糖假絲酵母 連翹脂

發(fā)皮安假絲酵母 曲通x-405

間型假絲酵母 桃葉珊瑚苷

解淀粉芽孢桿 硫代甜菜堿10

黑曲霉 黑介子苷