NF-κB抑制劑((+)-DHMEQ)

NF-κB抑制劑((+)-DHMEQ)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SIP1 /FITC 熒光素標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ABL1(v-abl Abelson murine leukemia viral oncogene homolog 1) ABL1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸埃希氏桿菌Geobacillus stearothermophilus豬纖溶原激活物抑制因子(PAI)

燼灰孢鏈霉菌Geobacillus stearothermophilus豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

單胞菌屬Paenibacillus polymyxa豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)

嗜熱脂肪芽胞桿菌Paenibacillus macerans豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

長(zhǎng)柄大環(huán)柄菇Bacillus coagulans豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)

 絲狀支原體絲狀亞種Bacillus coagulans豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)

根瘤菌Geobacillus stearothermophilus豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)

潮濕學(xué)校擬諾氏菌Bacillus licheniformis豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

釀酒酵母Paenibacillus macerans豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)

桔青霉Bacillus pumilus豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)

裂擬迷孔菌Bacillus licheniformis豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)

耐寒短桿菌Paenibacillus macerans豬組織因子(TF)

香菇Paenibacillus macerans豬組織因子(TF)

黃桿菌Paenibacillus macerans豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

釀酒酵母Paenibacillus macerans豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)

大豆慢生根瘤菌Paenibacillus macerans豬高鐵血紅蛋白(MHB)

5-羥色胺受體1B抗體紫紅紅球菌（玫瑰紅紅球菌）滑液支原體

14-3-3蛋白/14-3-3α/β/γ/δ/ε亞型抗體類短短芽孢桿菌蠟樣芽胞桿菌

5-羥色胺受體1A抗體強(qiáng)壯類芽孢桿菌破傷風(fēng)梭菌

14-3-3proteinζ/δ抗體麗短芽孢桿菌口蹄疫病毒（A型）
NF-κB抑制劑((+)-DHMEQ)SSB 英文名稱： 干燥癥SSB/La抗體 0.2ml

Ensconsin 英文名稱： 上皮細(xì)胞微管相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml

CD25/白介素2受體a鏈抗體 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml

human Rabies virus IgG/Biotin 人狂犬病免疫球蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GSK3 Beta (Tyr216) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 規(guī)格 0.1ml

ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細(xì)胞間粘附分子-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg