BTK抑制劑(Evobrutinib)

BTK抑制劑(Evobrutinib)公司正在出售的產(chǎn)品：P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit 小鼠P選擇線狀氧化銅 CP
PAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 小鼠L苯氨解氨三 AR,99.0%(易制品)
sCD30L(Mouse Soluble Cluster of diff

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
冬蟲夏草PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A1 Antibody核基質(zhì)蛋白4(NMP4)

耐熱鹽土生古菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC16A4 Antibody核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(RFT2)

明尼蘇達(dá)被毛孢Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A3 Antibody核苷還原M1(RRM1)

枯草芽孢桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC19A1 Antibody核苷磷化(NP)

大腸埃希氏菌堿性磷（AP）標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC1A1 Antibody和肽(CPP)

球孢白僵菌辣根過氧化物標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody合子阻滯基因1(ZAR1)

臺(tái)中金黃桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A2 Antibody汗αL(IDUα)

豌豆根瘤菌（都不提供）PE標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)

圓褐固氮菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)

大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)

噬組節(jié)桿菌生物標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)

變幻青霉生物標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC1A4 Antibody含溴區(qū)PHD指蛋白1(BRPF1)

鶴羽田戴爾福特菌辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC1A3 Antibody含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)

戊糖片球菌PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC1A6 Antibody含纈酪肽蛋白(VCP)

孟氏假單胞菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A1 Antibody含鈀蛋白(PALLD)

淺絳紅鏈霉菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A3 Antibody含卵巢癌免疫反應(yīng)抗原域蛋白2(OCIAD2)

神經(jīng)束蛋白186抗體純黃絲衣霉大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞提取物

膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體紅冬孢酵母大鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物

活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體大核青霉大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物

神經(jīng)激肽B抗體橘灰青霉大鼠淋巴內(nèi)皮細(xì)胞提取物
BTK抑制劑(Evobrutinib)大腸埃希 表莪術(shù)呋喃烯酮

氨酸棒桿 鮮酯

拉氏棲鹽湖 11-巰基十一烷酸

少孢酵母 4-表-莪術(shù)

熱帶假絲酵母 焦磷酸鐵

黑曲霉 旋覆花內(nèi)酯

黑曲霉 十二烷基苯磺酸鈣

傳染性牛鼻氣管炎病 

鍺栓孔 硫鳥嘌呤

雜色曲霉 1beta-羥基土木香內(nèi)酯

蠟狀芽孢桿 異山梨

ATCC 9006 1-(2,6-二)羥

大腸埃希 

稻生擲孢酵母 2--4

橙灰緊旋鏈霉 前胡E