c-Met抑制劑(MK-2461)

c-Met抑制劑(MK-2461)公司*的產品：Anti-phospho-STAT5a(pThr694)/FITC 熒光素標記抗磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗

商品介紹：

產品屬性：

中文名稱：c-Met抑制劑(MK-2461)

英文名稱：MK-2461

產品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

枯草芽孢桿菌Candida krusei

弗雷德里克斯堡假單胞菌Candida krusei

釀酒酵母Candida krusei

紅紫青霉Candida krusei

櫟金錢菌Candida krusei

新孢青霉Candida krusei

杰氏假單胞菌Candida krusei

鏈格孢 蘋果?；?/span>Candida famata

香栓孔菌Williopsis saturnus var. saturn

蠟狀芽孢桿菌Pichia subpelliculosa

紅球菌屬Geotrichum candidum

假單胞菌屬Geotrichum candidum

毛頭鬼傘Geotrichum candidum

藍色犁頭霉Pichia farinosa

釀酒酵母Candida guilliermondii

芽孢桿菌Candida guilliermondii var.carpophila

小鼠抗線粒體ADP/ATP載體(AAC)抗體免疫試劑盒Rho GTP激活蛋白32抗體人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)蘆薈苷

小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)免疫試劑盒能量平衡相關蛋白抗體人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)蘆薈寧

小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgM)免疫試劑盒禽腦脊髓炎病AEV抗體人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)蘆竹堿

小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgG)免疫試劑盒腺苷環(huán)化7抗體人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)魯斯考皂苷元
c-Met抑制劑(MK-2461)Sulfatase 1 英文名稱： 酯酶1抗體 0.2ml

EYA1 英文名稱： 轉錄因子EYA1抗體 0.2ml

蛋白酶激活受體-2抗體 Anti-PAR-2 0.2ml

Anti-phospho-Src (Tyr418)/FITC 熒光素標記磷酸化Src原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Ser536) 磷酸化細胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml

factor VIII 第八因子相關抗原(多肽片斷抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg