PI3K/AktandmTOR抑制劑

PI3K/AktandmTOR抑制劑公司正在出售的產(chǎn)品：NAP(Human neutrophilic alkaline phosphatase0 ELISA Kit 性Fmoc-N-三苯-L-天冬酰 97%
ALK(Human anapastic lymphoma kinase) ELISA Kit 人間變性淋巴瘤激Fmoc-N-三苯-L-谷氨酰 95%
CKMB(Human cytokini

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

巨大芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA11抗體Anti-CCN3 AntibodyC反應(yīng)蛋白(CRP)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA12抗體Anti-CCNA1 AntibodyC多肽(CP)

黑色附球霉原鈣粘蛋白β12抗體Anti-CCNA2 Antibody(PB0402)CXC趨化因子受體7(CXCR7)

塔賓曲霉原鈣粘蛋白β3抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體4(CXCR4)

朱黃籃狀菌原鈣粘蛋白γB1抗體Anti-CCNA1 AntibodyCXC趨化因子受體3(CXCR3)

大腸埃希菌原鈣粘蛋白γB2抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體1(CXCR1)

腸桿菌屬原鈣粘蛋白γB4抗體Anti-CCNB1 Antibody(PB0130)CXC趨化因子配體16(CXCL16)

香菇原鈣粘蛋白γB6抗體Anti-CCNB2 AntibodyCX3C趨化因子受體1(CX3CR1)

膠孢鐮孢原鈣粘蛋白γC3抗體Anti-CCNB2 AntibodyCOP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)

芥黃蜜環(huán)菌原鈣粘蛋白γC4抗體Anti-CCNB1 Antibodyc-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)

山茶磷蛋白聚糖PTPRZ抗體Anti-CCND2 Antibodyc-Jun基末端激/應(yīng)急激活的蛋白(JNK/SAPK)

桿狀毛霉神經(jīng)特異蛋白酪磷N5抗體Anti-CCND1 AntibodyCDCP1(CDCP1)

豬瘟病間接免疫熒光足表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體Anti-CCND3 Antibody(PB0131)CD8分子(CD8)

Bacillus tequilensis孕激受體抗體Anti-CCND1 AntibodyCD82分子(CD82)

枯草芽孢桿菌神經(jīng)突觸蛋白PCLO抗體Anti-CCND1 AntibodyCD73分子(CD73)

諾爾氏菌早老γ分泌2抗體Anti-CCP110 AntibodyCD6分子(CD6)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：0.98

: AS1.166M010資源名稱: 苜蓿根瘤菌 質(zhì)量規(guī)格：0.99

小刺青霉Penicillium│spinulosum 質(zhì)量規(guī)格：0.98
PI3K/AktandmTOR抑制劑大腸埃希 麥康凱瓊脂（含結(jié)晶紫）雌二Elisa

茶褐斑盤多毛孢 SDAY培養(yǎng)基雌三Elisa

葡萄座腔 液雌酮Elisa

嗜熱脂肪地球芽胞桿 Bolton肉湯添加劑孕酮Elisa

異常漢遜酵母 磺嘧啶鈉溶液（12mg）透明質(zhì)酸Elisa

大腸埃希氏桿 煌綠瓊脂培養(yǎng)基甲狀腺Elisa

廈門假單胞 多粘B（1萬單位）檸檬酸合Elisa

猴頭 蛋白胨緩沖液多巴Elisa

臥孔 SSDC培養(yǎng)基（ISO）腎上腺Elisa

ATCC 10145 溶肉湯基礎(chǔ)去甲腎上腺Elisa

產(chǎn)氨短桿 營養(yǎng)肉湯（日本標(biāo)準(zhǔn)）5羥色Elisa

云南尼阿巴 BTB培養(yǎng)基乙酰酯Elisa

銀耳 THB培養(yǎng)基γ氨基丁酸Elisa

嗜芽孢桿 PS瓊脂卵黃蛋白原Elisa

木耳 艾格LT100肉湯膠原蛋白Elisa