COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-1）

COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-1）公司*的產(chǎn)品：Anti-Inhibin Beta C /FITC 熒光素標(biāo)記抑制素βC抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-RRAD/FITC 熒光素標(biāo)記RRAD抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD9 錨蛋

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-1）

英文名稱：Cot inhibitor-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(ACP-5b)ELISA檢測試劑盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit 96T/48T

人抗SSA/Ro抗體 免疫試劑盒 Human ai-SSA/Ro aibody ELISA Kit

Rat15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1α ELISA Kit

大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T

人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)免疫試劑盒 Human PIAS3 ELISA Kit

英文名稱MousePGE2ELISAKit小鼠前列腺素E2(PGE2)規(guī)格：96T/48T

TUNEL流式細(xì)胞儀分析試劑盒10次

Rabbitoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISA試劑盒兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human colony-stimulating factor (CSF) ELISA Kit 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒

GuineapigEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANG-II(RatangiotensionII)ELISAKit大鼠血管緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

血液輔含量比色法定量檢測試劑盒20次

PorcineD-Dimer,D2DELISAKit豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-1）STAC 英文名稱： STAC1蛋白抗體 0.2ml

FLG 英文名稱： 絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體 0.1ml

胃粘液素抗體 anti-MUC5AC/Mucin 5AC 0.1ml

Anti-Sema3A/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Ser83) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml

Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)