公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MEK5抑制劑(BIX02188)
英文名稱:BIX02188
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
BIX02188是MEK5選擇性抑制劑,IC50為4.3nM,還抑制ERK5的催化活性,IC50為810nM,對MEK1,MEK2,ERK2和JNK2無抑制性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:334949-59-6 純度:98.80% 分子量:412.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
猴頭菌可逆型蛋白快速染色試劑盒Escherichia coli小鼠血小板活化因子(PAF)
臥孔菌DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照片斷(bp):100 、200、300、400、500、600bpEscherichia coli小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)
ATCC 10145DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照片斷(bp):100 、300、500、700、900、1200bpEscherichia coli小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)
產(chǎn)短桿菌DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照片斷(bp):200 、500、800、1200、2000、3000、4000bpEscherichia coli小鼠肌球蛋白(MYS)
云南尼阿巴菌DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照片斷(bp):100 、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1500bpEscherichia coli小鼠肌球蛋白(MYS)
銀耳DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)參照片斷 (bp):200 、400、600、800、1000、1500bpEscherichia coli小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)
嗜芽孢桿菌質(zhì)粒小提試劑盒Escherichia coli小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)
木耳質(zhì)粒小提試劑盒Escherichia coli小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)
黃須腹菌膠上DNA回收試劑盒Escherichia coli小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)
鏈霉菌 (燼灰類群)膠上DNA回收試劑盒Escherichia coli小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
孟氏假單胞菌DNA膠回收試劑盒Escherichia coli小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)
淡紫擬青霉動物DNAoutEscherichia coli小鼠上皮中性?;罨?8(ENA-78/CXCL5)
大腸埃希氏菌血液DNAou提取試劑盒)Escherichia coli小鼠上皮中性?;罨?8(ENA-78/CXCL5)
黑曲霉植物DNAout(盒)Escherichia coli小鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
日本曲霉病DNAout(病DNA快速提取液)Escherichia coli小鼠抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)
解幾丁質(zhì)纖維單胞菌革蘭氏陰性細(xì)菌DNAout提取試劑盒Escherichia coli小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)
神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體味牛肝菌小鼠骨髓纖維原細(xì)胞
谷受體2B抗體禾粘座孢霉(或禾漆斑菌)小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞
核小體組裝蛋白1抗體白杯絲座孢人宮頸典型鱗狀細(xì)胞
類固受體激活蛋白2抗體褐色小杈枝霉野生型人c-kit受體細(xì)胞株
MEK5抑制劑(BIX02188)Corallococcus sp. 硫代甜菜堿8
苕子根瘤 枸杞多糖
檸檬色節(jié)桿 維生B5
黃金殼囊孢 八烷基基化
假單胞屬 十二烷基硫酸鎂
腐皮鐮孢
焦曲霉 3-(N,N-二甲基十二烷基)烷磺酸鹽
陰溝腸桿 睪酮
哈茨木霉 芐索
赭曲霉
深海微小桿* 苯扎溴
纖維纖維微 十六烷基二化
臘狀芽胞桿 D-山梨
多粘類芽孢桿 特縮合劑
香菇 補(bǔ)骨脂查爾酮