商品介紹:
SEA0400是一種新穎的,具有選擇性的Na+-Ca2+exchanger抑制劑,在培養(yǎng)的神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞中,能夠抑制Na+-依賴性Ca2+的吸收,IC50值為5-33nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):223104-29-8 純度:99.89% 分子量:371.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Na+-Ca2+exchanger抑制劑(SEA0400)
英文名稱:SEA0400
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
γ干擾受體(IFN-γR)ELISA Kit英文名稱:IFN-γR ELISA Kit芳基硫酯A抗體包裝1g
γ干擾(IFN-γ)ELISA Kit英文名稱:IFN-γ ELISA Kit擬南芥ACA11抗體包裝1g
γ干擾(IFNγ)ELISA Kit英文名稱:IFNγ ELISA KitAHA3抗體(擬南芥)包裝250mg
γ分泌(GACE)ELISA Kit英文名稱:GACE ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝5g
γ-基丁(GABA)ELISA Kit英文名稱:GABA ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝50MG
γ基丁(GABA)ELISA Kit英文名稱:GABA ELISA Kit中性膽固酯解1抗體包裝1g
β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA Kit英文名稱:ARRB2 ELISA Kit人星形膠質(zhì)抗體包裝5g
β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA Kit英文名稱:β-TG ELISA Kit縮A抗體包裝100g
β細(xì)胞(BTC)ELISA Kit英文名稱:BTC ELISA Kit膜粘連蛋白6抗體包裝25g
β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)ELISA Kit英文名稱:BACE1 ELISA Kitβ淀粉樣肽(25-35)抗體包裝500g
β葡萄糖醛苷(βGD)ELISA Kit英文名稱:βGD ELISA Kit血管緊張I抗體包裝1g
β葡糖苷(β-glucosidase)ELISA Kit英文名稱:β-glucosidase ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)抗體(N端20肽)包裝250mg
β內(nèi)酰胺抑制劑(BLI)ELISA Kit英文名稱:BLI ELISA KitADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA Kit英文名稱:β-EPR ELISA Kit精加壓受體2抗體包裝25g
β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA Kit英文名稱:β-EP ELISA Kit凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體包裝5g
磷化蛋白激B抗體基質(zhì)金屬蛋白10(MMP10)RG108 (N-Phthalyl-L-tryptophan) 是一種非核苷的 DNA 基轉(zhuǎn)移 (DNMTs) 抑制劑 (IC50=115 nM),RG10
Na+-Ca2+exchanger抑制劑(SEA0400)順鉑耐藥相關(guān)蛋白9抗體L-上腺(標(biāo)準(zhǔn)品) Sumatriptan succinate
22號(hào)染色體開放閱讀框40抗體L-絲(標(biāo)準(zhǔn)品) Streptomycin Sulphate
嗜粒趨化蛋白3抗體L-天門冬(標(biāo)準(zhǔn)品) Streptomycin Sulphate
21號(hào)染色體開放閱讀框33抗體L-巖藻糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydrostreptomycin Sulphate
角蛋白15抗體L-異亮(標(biāo)準(zhǔn)品) Diclofenac sodium
角蛋白14抗體Lenalidomide(標(biāo)準(zhǔn)品) Diclofenac sodium
神經(jīng)NB3特定蛋白抗體Letrozole(標(biāo)準(zhǔn)品) Gabapentin
促胃泌受體抗體Levonorgestrel(標(biāo)準(zhǔn)品) Gabapentin
單克抗體Loperamide HCl(標(biāo)準(zhǔn)品) Domperidone