CK1抑制劑(D4476)

CK1抑制劑(D4476)公司*的產(chǎn)品：E3/UBPL(Human E3/ubiquitin-protein ligase) ELISA Kit 人泛連接甘氨-DL-氨 BR
MCT(Human mast cell tryptase) ELISA Kit 人肥大類胰蛋白L-谷氨鹽鹽 98%
DT(Human dopachrome tautomerase) ELISA Kit 人多巴色異

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CK1抑制劑(D4476)

英文名稱：D4476

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

瓜亡革菌泛激1抗體Anti-CCNT1 AntibodyCD68分子(CD68)

枯草芽孢桿菌泛激2抗體Anti-CCNE1 AntibodyCD63分子(CD63)

韓國(guó)海桿狀菌泛激3抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子樣蛋白(CD5L)

微紫青霉p53調(diào)控PA26核蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD5分子(CD5)

香栓孔菌26S蛋白調(diào)節(jié)亞型S5a抗體Anti-CCR10 AntibodyCD4分子(CD4)

枯草芽胞桿菌枯草亞種絲/蘇蛋白磷3B抗體Anti-CCR2 AntibodyCD45分子(CD45)

靈芝蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1α抗體Anti-CCR10 AntibodyCD44分子(CD44)

牛肝菌（可訂購(gòu)）泛連接抗體Anti-CCR2 AntibodyCD44變體6(CD44-v6)

銹色房屋芽胞桿菌PGBD3蛋白抗體Anti-CCR1 AntibodyCD40配體(CD40L)

赭曲霉泛激4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD3分子(CD3)

壞死梭桿菌壞死亞種膜鈣ATP1抗體Anti-CCR2 AntibodyCD34分子(CD34)

Taonella膜鈣ATP4抗體Anti-CCR3 AntibodyCD30分子(CD30)

嗜放線線束菌*膜鈣ATP4B抗體Anti-CCR3 AntibodyCD22分子(CD22)

大腸埃希氏桿菌膜鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP抗體Anti-CCR3 AntibodyCD209分子(CD209)

Paenibacillus溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體Anti-CCR4 AntibodyCD19分子(CD19)

白色念珠菌脈周蛋白1抗體（胃癌抗原蛋白Ga50）Anti-CCR4 AntibodyCD15分子(CD15)

芽胞桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：98%,BR,一物

鴨瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

: AS3.3416資源名稱: 外來毛霉 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CK1抑制劑(D4476)黃須腹 沙氏葡萄糖瓊脂膠原蛋白IElisa

鏈霉 (燼灰類群) 沙氏葡萄糖霉瓊脂膠原蛋白IIElisa

孟氏假單胞 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞T培養(yǎng)基肌球蛋白Elisa

淡紫擬青霉 1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養(yǎng)基抗肌蛋白Elisa

大腸埃希氏 WPM培養(yǎng)基谷氨酸脫羧Elisa

黑曲霉 MT培養(yǎng)基乙酰酯Elisa

日本曲霉 NA培養(yǎng)基-過氧化物Elisa

解幾丁質(zhì)纖維單胞 可溶性淀粉培養(yǎng)基過氧化氫Elisa

海岸擬諾卡氏 霍亂紅胨水超氧化物歧化Elisa

銹色淺野氏 AK瓊脂（2號(hào)）羥自由基Elisa

大腸埃希氏桿 牛肝顆粒超氧陰離子Elisa

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 大腸群培養(yǎng)基（日本）抗氧化Elisa

焦曲霉 stuart運(yùn)送培養(yǎng)基（含活性炭）過氧化物Elisa

球孢白僵 DPD培養(yǎng)基鈣調(diào)神經(jīng)磷酸Elisa

巴基斯坦賴氨酸芽孢桿 念珠顯色培養(yǎng)基總抗氧化能力Elisa