商品介紹:
LP-533401是調(diào)節(jié)腸道內(nèi)5-羥色胺產(chǎn)生的色氨酸羥化酶1抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):945976-43-2 純度:98.0% 分子量:526.48 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):色氨酸羥化酶1抑制劑(LP-533401)
英文名稱(chēng):LP-533401
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT3)ELISA Kit英文名稱(chēng):NT3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64B抗體包裝100g
神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1)ELISA Kit英文名稱(chēng):NOS1 ELISA Kit組蛋白H3-K9基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)ELISA Kit英文名稱(chēng):NRP1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員6抗體包裝5g
神經(jīng)纖維2(NF2)ELISA Kit英文名稱(chēng):NF2 ELISA Kitcornichon樣蛋白抗體包裝100g
神經(jīng)調(diào)節(jié)4(NRG4)ELISA Kit英文名稱(chēng):NRG4 ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白1抗體包裝25g
神經(jīng)調(diào)節(jié)1(NRG1)ELISA Kit英文名稱(chēng):NRG1 ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白2抗體包裝500g
神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)ELISA Kit英文名稱(chēng):NPY5R ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體包裝1g
神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)ELISA Kit英文名稱(chēng):NPY2R ELISA Kit分裂周期2樣蛋白激5抗體包裝250mg
神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)ELISA Kit英文名稱(chēng):NPY1R ELISA KitCD20樣蛋白抗體(造血干4跨膜蛋白3)包裝10MG
神經(jīng)肽S(NPS)ELISA Kit英文名稱(chēng):NPS ELISA Kit周期蛋白依賴(lài)性激CABLES1抗體包裝25g
神經(jīng)肽FF(NPFF)ELISA Kit英文名稱(chēng):NPFF ELISA Kit分裂周期相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)ELISA Kit英文名稱(chēng):NEF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體包裝5mg
神經(jīng)介S(NMS)ELISA Kit英文名稱(chēng):NMS ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體包裝1ml
神經(jīng)介B(NMB)ELISA Kit英文名稱(chēng):NMB ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160抗體包裝100mg
神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA Kit英文名稱(chēng):NKB ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體包裝25mg
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體3試劑盒澤瀉 B;Alisol B
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2試劑盒澤瀉 A;Alisol A
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1試劑盒正丁; Butylamine
色氨酸羥化酶1抑制劑(LP-533401)糖磷脂酰肌抗體麻醉椒 Polyamide
磷化gp130抗體馬鞭草(標(biāo)準(zhǔn)品) Polyamide
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移ζ1抗體馬勃(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium phosphate dibasic dihydrate
甘-N-酰轉(zhuǎn)移抗體馬齒莧(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium sulfate anhydrous
甘-N-酰轉(zhuǎn)移樣1抗體馬兜鈴(北馬兜鈴)(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium sulfate anhydrous
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體馬兜鈴A(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium bicarbonate
磷化葡萄糖合成1抗體馬兜鈴C Tetrabutylammonium iodide
糖原蛋白1馬兜鈴D Trioctylamine
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體馬兜鈴II Sodium oxalate solution