NEP抑制劑（AHU-377 hemicalcium salt）

NEP抑制劑（AHU-377 hemicalcium salt）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-LTB4-R2/FITC 熒光素標(biāo)記白三烯B4受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TANK/FITC 熒光素標(biāo)記TANK抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY4 腺苷酸環(huán)

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
磷咯萘啶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： TopiramateCAP1抗體包裝5g

磷喹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tozasertib，VX-680/MK-0457粒-巨噬集落激因子3抗體包裝1g

磷喹（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Trospium chloride 表面趨化因子受體7抗體包裝250mg

磷氫鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： AG-014699色c氧化10抗體包裝5g

膦鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Carfilzomib/PR171CRTAM抗體包裝5g

硫噴妥（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： CEP-18770單核趨化蛋白4抗體包裝100ml

硫普羅寧（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Managlinat Dialanetil/CS-917NK抑制性受體2DL3抗體包裝25ml

硫阿米卡星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nolatrexed dihydrochlorideCRX抗體包裝100g

硫阿托品(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： PD 173074CD8抗體包裝25g

硫安普霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： PH-797804磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝500g

硫巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tifluadom/KC-5103磷化原癌蛋白CBL2抗體包裝5g

硫長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝25g

硫長春新堿/硫基長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Valacyclovir HCl磷化周期依賴激2抗體包裝5g

硫多粘菌B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Vecuronium Bromide分裂周期蛋白25抗體包裝25g

硫（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vecuronium Bromide磷化分裂周期蛋白25抗體包裝5g

腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 質(zhì)量規(guī)格：>98%纖連蛋白試劑盒苔黑酚葡萄糖苷;Orcinolgluco

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖調(diào)蛋白試劑盒太子參環(huán)肽B;Heterophyllin

球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR細(xì)小病B19試劑盒土木香內(nèi)酯;Alantolactone
NEP抑制劑（AHU-377 hemicalcium salt）小鼠γ干擾紅景天；草質(zhì)甙；Human, Mouse

人皮膚T虜獲趨化因子紅芪（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

豚鼠免疫球蛋白G紅曲（特殊發(fā)酵）（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

FSH 禽類聯(lián)免疫ELISA Kit葒草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

LH 禽類聯(lián)免疫ELISA Kit厚樸(厚樸)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

PRL 禽類聯(lián)免疫ELISA Kit厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

魚雌二厚樸總酚(對照品)Human

大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白胡薄荷;長葉薄荷Human, Mouse

兔子腫瘤壞死因子α胡黃連（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse