JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)

JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)公司*的產(chǎn)品：Anti-Inhibin Alpha/Biotin 生素化抑制素α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Runx3/FITC 熒光素標(biāo)記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus ant

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)

英文名稱：TCS JNK 5a

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit

小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測試劑盒Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T

人抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒 Human ai-Smith aibody ELISA Kit

Rat17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit大鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞MAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次

IL-1βELISA試劑盒魚類白介素1β規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒

HumansubstancePreceptor,SP-RELISAKit 人P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

Humancardioophln1,CT-1ELISA試劑盒人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品NOS基因檢測試劑盒20次

Humansolubleadhesionmolecules，SamELISAKit人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human poliomyelitis virus IgG (PV-IgG) ELISA Kit 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒

guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANG-II(HumanangiotensionII)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T

血液鈣(Ca)定量檢測試劑盒50次

PorcineCoisolELISAKit豬皮醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
JNK3/JNK2/JNK1和p38α抑制劑(TCS JNK 5a)STAU2 英文名稱： 雙鏈RNA結(jié)合蛋白Staufen2抗體 0.2ml

factor XIII 英文名稱： 13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 0.2ml

錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗體 anti-MLH1 0.1ml

Anti-SEL1L/FITC 熒光素標(biāo)記SEL1L抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Paxillin(Tyr88) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格 0.1ml

Acinus peptide ACINUS 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg