激酶2(Chk2)抑制劑(BML-277)

激酶2(Chk2)抑制劑(BML-277)公司*的產(chǎn)品：Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、猴、牛化酰羧化抗體IgG溴化 ACS
AchE/FITC 熒光標(biāo)記酰膽抗體IgG銻 99.99% metals basis
CHRNA2/FITC 熒光標(biāo)記煙型酰膽受體A2(神經(jīng)型)抗體IgG油 98%
Beta-

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：激酶2(Chk2)抑制劑(BML-277)

英文名稱：BML-277

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

嗜中溫寒冷桿菌艾滋病?。乖?/span>Anti-B4GALT3 Antibodyβ-羥丁(OHβ)

解脂亞羅酵母熱休克蛋白-60（抗原）Anti-B4GALT1 Antibodyβ-內(nèi)啡肽(βEP)

Mucor ardhlaengiktus熱休克蛋白-70（多肽抗原）Anti-B4GALT3 Antibodyβ-骨膠原交聯(lián)(βCTx)

寬被多年臥孔菌銜接蛋白α抗原Anti-B4GALT5 Antibodyβ-促脂(βLPH)

白鬼筆Caspase 激活的脫氧核糖核抑制劑（抗原）Anti-BACH2 Antibodyβ2-微球蛋白(β2M)

釀酒酵母胰島降解（抗原）Anti-BAG1 Antibodyβ-1,4-半乳糖轉(zhuǎn)移1(β4GALT1)

葡萄牙棒孢酵母人胰島樣生長(zhǎng)因子-I受體Anti-BAG4 Antibodyβ-1,4-N-乙酰半乳糖基轉(zhuǎn)移2(β4GALNT2)

需鈉弧菌胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-5(抗原)Anti-BAGE2 Antibodyβ-1,3-葡糖基移1(β3GAT1)

斑玉蕈胰島（抗原）Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)

根瘤菌APC活化蛋白C抗原Anti-BAGE3 Antibodyα-乳清蛋白(αLA)

假單胞菌屬脂肪炎癥因子Apelin抗原Anti-BAGE4 Antibodyα-內(nèi)啡肽(αEP)

巨大芽胞桿菌Apelin receptor抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-黑色激(αMSH)

嗜松青霉APG4B自噬相關(guān)抗原Anti-BAIAP2L1 Antibodyα-骨膠原交聯(lián)(αCTx)

釀酒酵母載脂蛋白A1抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα-胞襯蛋白(SPTAN1)

黑曲霉凝聚α/β抗原Anti-BAIAP2L2 Antibodyα白蛋白(AFM)

運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌胰島受體-α（抗原）Anti-BAK1 Antibodyα2-纖溶抑制因子(α2PI)

磷相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Lysobacterdaejeonensis人正常結(jié)腸細(xì)胞

磷脂磷2結(jié)構(gòu)域3抗體蘑菇假單胞菌急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞

石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體過(guò)渡原囊菌人骨髓基質(zhì)細(xì)胞

血小板白細(xì)胞C激底物同源結(jié)構(gòu)域M2抗體丁梭菌小鼠單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞
激酶2(Chk2)抑制劑(BML-277)小枝鏈霉 6-羥基-2,5,7,8-四并二氫吡喃-2-羧酸

嗜絲副球 明膠

黏液桿 N-甲基-D-天冬

產(chǎn)酸酸桿 乙氧基喹啉

枯草芽胞桿 生物酰肼

枯草芽孢桿 羧甲基殼聚糖

鼠李糖乳桿 睪酮

類植物乳桿 新亞甲藍(lán)N

彩色豆馬勃 司他夫定

成團(tuán)泛 5-氨基乙酰酸鹽酸鹽

土地桿屬 三磷酸腺苷酸

滑假絲酵母 二十四烷

哈茨木霉 頭孢噻呋鈉

釀酒酵母 5-氨基熒光

谷棒桿Ⅰ型 檸檬酸鉍 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)