Stat3抑制劑(SH5-07)

Stat3抑制劑(SH5-07)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PDGF-A/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長因子-A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗大鼠IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體 Anti-DPPA2 0.2ml
Goat A

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

桃褐腐核盤菌Rhizobium sp.

中國臺灣根霉Azospirillum sp.

黃絲膜菌Rhizobium sp.

腸膜明串珠菌Azospirillum sp.

釀酒酵母Rhizobium sp.

大腸埃希菌Rhizobium sp.

圍小從殼Corynebacterium ammoniagenes

臭曲霉Corynebacterium ammoniagenes

盲腸腸球菌Corynebacterium ammoniagenes

薄花邊傘7-5Corynebacterium ammoniagenes

單胞菌Corynebacterium ammoniagenes

費(fèi)氏中華根瘤菌Corynebacterium ammoniagenes

約氏乳桿菌Corynebacterium ammoniagenes

放線多孢菌Corynebacterium ammoniagenes

暗點(diǎn)雙座炭殼菌Corynebacterium ammoniagenes

氏富鹽菌Corynebacterium ammoniagenes

小鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒磷化鈉ATPα1多肽抗體人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)對羥基肉桂

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒Na+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)對傘花烴

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒肌動(dòng)蛋白樣蛋白6B抗體人膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)對香豆

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體人膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)對葉百部堿
Stat3抑制劑(SH5-07)5HT5A receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體5A抗體 0.2ml

E2F3 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 0.1ml

金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 Anti-TIMP-2 0.1ml

Anti-TNF-alpha/ TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人壞死因子-α單克隆抗體 IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Kidins220 (Ser918) 磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

PDGF-A 血小板源性生長因子-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg