5myc-UTR-LUC抑制劑（Episilvestrol）

5myc-UTR-LUC抑制劑（Episilvestrol）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-phospho GAP-43(pSer41)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgA/Gold 金標(biāo)記兔抗人IgA(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

稀產(chǎn)鏈霉菌Saccharomyces sp.

尖孢*Saccharomyces sp.

硫磺菌Saccharomyces cerevisiae

堅(jiān)菌絲單頂孢Saccharomyces cerevisiae

紅細(xì)菌屬Saccharomyces cerevisiae

白靈菇Saccharomyces cerevisiae

鏈霉鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Saccharomyces cerevisiae

冷溫木克酵母Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

弗氏檸檬桿菌Saccharomyces cerevisiae

藤黃微球菌Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae

環(huán)狀芽胞桿菌Saccharomyces cerevisiae

大腸埃希氏菌Saccharomyces cerevisiae

脆弱鏈霉菌Saccharomyces cerevisiae

小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒β晶體蛋白B1抗體人鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)水甘草堿

小鼠GTP KRas 免疫試劑盒磷化Bax抗體人鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)水合氧化前胡

小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體人阿米巴(Amebiasis)水黃皮

小鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體人阿米巴(Amebiasis)水晶蘭苷
5myc-UTR-LUC抑制劑（Episilvestrol）Synaptopodin 英文名稱： 突觸足蛋白抗體 0.1ml

ETS2 英文名稱： 癌基因ETS2抗體 0.1ml

抗蛇毒蛋白抗體 Anti-Snake poison Protein 0.2ml

Anti-TFPI/LACI /FITC 熒光素標(biāo)記組織因子途徑抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MAPKAPK5(Thr182) 磷酸化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg