公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HSP90抑制劑(Debio 0932)
英文名稱(chēng):Debio 0932
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Debio0932(CUDC-305)是HSP90新穎的抑制劑,在很多細(xì)胞癌癥中有很強(qiáng)的生物活性和抗增殖能力。(IC50值是220nmol/L) 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1061318-81-7 別名:CUDC-305 純度:99.44% 分子量:442.58 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
膠胞羅丹明標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A2 Antibody過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ(PPARγ)
草菇Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC5A1 Antibody過(guò)氧化物體增殖物激活受體α(PPARα)
鏈霉菌Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過(guò)氧化物體生物合成因子2(PEX2)
蠟狀芽孢桿菌Cy5標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A1 Antibody過(guò)氧化還原6(PRDX6)
嗜堿假單胞菌Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過(guò)氧化還原5(PRDX5)
棱柱散尾菌PE標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過(guò)氧化還原4(PRDX4)
榛針孢酵母FITC標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過(guò)氧化還原3(PRDX3)
枯草芽孢桿菌生物標(biāo)記的兔抗馬IgMAnti-SLC6A4 Antibody過(guò)氧化還原2(PRDX2)
Cy5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A5 Antibody過(guò)氧化還原1(PRDX1)
釀酒酵母生物標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A1 Antibody過(guò)氧蛋白同源物(PXDN)
解橡膠諾卡氏菌FITC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC7A3 Antibody果糖二磷縮C(ALDOC)
土壤桿菌羅丹明標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A2 Antibody果糖-3-激(FN3K)
尖鐮孢PE-Cy3標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A1 Antibody(PB0176)歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)
德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLC9A3R1 Antibody胱天蛋白激活脫氧核糖核(CAD)
Ohtaekwangia koreensisAPC標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLIT2 Antibody胱天蛋白9(CASP9)
泳池鞘單胞菌Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗牛IgGAnti-SLK Antibody胱天蛋白8(CASP8)
增殖相關(guān)核仁抗原抗體芽枝狀枝孢大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌大鼠子宮成纖維細(xì)胞提取物
NALP12抗體嚙蝕艾肯菌大鼠卵巢上皮細(xì)胞提取物
富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體伯頓擬內(nèi)孢霉大鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物
HSP90抑制劑(Debio 0932)巨大芽孢桿 β-巰基乙鹽酸鹽
蜂蜜曲霉 喹啉黃
Penicillium 8-氮鳥(niǎo)嘌呤
海泥黃桿 草甘二磷
蠟狀芽孢桿 異丹酚酸C
鏈球(不定種) 調(diào)環(huán)酸鈣
釀酒酵母 丹酚酸A甲酯
枯草芽孢桿 3-羥基-5-甲基異惡唑
型副傷寒沙門(mén)氏 地膚子皂苷Iia
云南擲孢酵母 噻苯咪唑
釀酒酵母 地膚子皂苷II
根癌農(nóng)桿GV3101 D-(+)-蘋(píng)果酸
桔青霉 竹節(jié)參皂苷V甲酯
豬瘟病 甘油三酯
樹(shù)舌靈芝 白花前胡香豆精I(xiàn)II