u-PA抑制劑（UKI-1）

u-PA抑制劑（UKI-1）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-HMGB1/FITC 熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phospho-Src(pTyr529)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化Src原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ATF6 活

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

發(fā)酵冬蟲夏草菌粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sotalol HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝1g

法篳枝苷英文名稱： H-89 2HCl磷化活化蛋白激B抗體包裝5g

法卡林二英文名稱： Fusidine磷化組蛋白去基化JMJD2B抗體包裝1g

番茄苷英文名稱： Fusidine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白2抗體包裝25g

番茄紅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3-Iodo-L-tyrosine絲裂原活化蛋白激相互作用蛋白3抗體包裝5g

番茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dess-Martin periodinane磷化基末端激1/2/3抗體包裝1g

番石榴苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cidofovir磷化蛋白質(zhì)酪激JAK-1抗體包裝25g

番石榴葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Amino-4-imidazolecarboxamide基末端激2抗體包裝5g

番瀉苷A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： AGM-1470 連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5MG

番瀉苷B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium taurolithocholate基末端激3抗體包裝50MG

番瀉苷C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： glycochenodeoxycholic acid (GCDCA）磷化活化蛋白激B抗體包裝100g

番瀉苷D（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium taurohyodeoxycholate hydrateJmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去基化H3-K36抗體包裝500g

番瀉葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)組蛋白去基化JARID2抗體包裝5g

翻白草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ValinomycinJAK和微管相互作用蛋白2抗體（JAK和微管相互作用蛋白2）包裝100g

反式茴香腦英文名稱： 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole活化蛋白激B抗體包裝25g

隔指孢Dactylella│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR抗著絲點(diǎn)抗體試劑盒甘草二;Dipotassium gl

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量≥99.0%(HPLC)抗轉(zhuǎn)谷?？贵w試劑盒戈米辛J;Gomisin J

孟氏假單胞菌Pseudomonas│mandelii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗轉(zhuǎn)谷?？贵w試劑盒瓜;L(+)-Citrulline
u-PA抑制劑（UKI-1）原癌因蛋白/活化蛋白1抗體卡維?。?biāo)準(zhǔn)品） Moxonidine

死亡活化蛋白抗體克拉霉（標(biāo)準(zhǔn)品） Moxonidine

角蛋白19抗體克拉維 Nepafenac

角蛋白2抗體克林霉磷酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Nepafenac

角蛋白4抗體克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Nicarbazin

色b245輕鏈抗體喹乙;喹酰（標(biāo)準(zhǔn)品） Nimustine HCl(ACNU)

5號染色體開放閱讀框44抗體醌式利福平（標(biāo)準(zhǔn)品） NVP-BEZ 235

心臟特異性絲蛋白抗體拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品） Pemirolast potassium

胞漿型磷脂A2抗體拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品) Perindopril erbumine