產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):5-Deiodinase抑制劑(Iopanoic acid)
英文名稱(chēng):Iopanoic acid
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Iopanoic acid是一個(gè)5-Deiodinase抑制劑,也是一種碘造影劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):96-83-3 分子量:570.93 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
薯莨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hydroxyapatite磷脂?;鞍拙厶?抗體包裝5g
薯蕷皂苷;重樓皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M糖原合激3α抗體包裝100mg
薯蕷皂;薯蕷皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Hydroxypropylmethylcellulose慶大霉單克抗體包裝1g
雙氫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移ω1抗體包裝1g
植提標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱(chēng): HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose間隙連接蛋白31抗體包裝5g
雙去氧基姜黃英文名稱(chēng): D-(+)-Maltose monohydrate 甘-N-基轉(zhuǎn)移包裝10MG
雙去氧基姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): ONX0914;PR957G蛋白偶聯(lián)受體75抗體包裝100g
雙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): N-Nonanoyl-N-methylglucamineGATA結(jié)合蛋白4抗體包裝25g
防風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Methyl cellulose兔抗γ1基丁抗體包裝5g
飛薊賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Methyl cellulose, middle viscosityG蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體包裝10g
飛薊寧英文名稱(chēng): D-(-)-Ribose慶大霉抗體包裝25g
飛薊汀;飛薊亭英文名稱(chēng): D-(-)-Ribose半乳糖凝集9抗體包裝5g
合氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): DL-Dithiothreitol促代謝型谷受體2+4抗體包裝100g
金鳳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D(+)-TuranoseGPNMB抗體包裝25g
晶蘭苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Fructose 1,6-bisphosphate sodium saltγ谷酰轉(zhuǎn)肽2輕鏈抗體包裝1g
橘橙鏈霉菌Streptomyces│aurantiacus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)肽2試劑盒羅漢松樹(shù)脂酚 ;Matairesinol
鐮孢屬菌種Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品母親DPP同源物4試劑盒雷公藤定堿;Wtlfordine
利文斯頓島希瓦氏菌Shewanella│livingstonensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移試劑盒蘿卜硫;Sulforaphane
5-Deiodinase抑制劑(Iopanoic acid)胰島原抗體溴后馬托品 Pararosaniline acetate
平足蛋白gp36/淋巴管內(nèi)皮蛋白抗體溴莫尼定 Paxilline*, from Penicillium paxilli
核苷內(nèi)焦磷/磷二酯1抗體鹽阿比朵爾 Penicillic acid
胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A抗體鹽 Penitrem A from Penicillium palitans
蛋白酪磷PTPσ抗體鹽阿扎司瓊 Pentaacetyl-β-D-galactopyranose
ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體鹽安非他 Permutit
神經(jīng)叢蛋白A3抗體鹽安非他(進(jìn)口) Phenolphthalein diphosphate tetrasodium salt
磷化蛋白酪磷1C抗體鹽溴索 Phenothiazine
絲/蘇蛋白磷4C抗體鹽奧布 Phenoxyaceti acid sodium salt
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)