商品介紹:
BIX02565是一種有效的核糖體S6激酶2(RSK2)抑制劑,IC50為1.1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1311367-27-7 純度:98.48% 分子量:458.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RSK2抑制劑(BIX 02565) | BIX 02565 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
胱天蛋白11(CASP11)ELISA Kit英文名稱:CASP11 ELISA KitC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體包裝25mg
胱天蛋白1(CASP1)ELISA Kit英文名稱:CASP1 ELISA KitCD226抗體包裝25g
胱硫醚β合(CβS)ELISA Kit英文名稱:CβS ELISA KitCD26抗體包裝5g
骨形成蛋白8B(BMP8B)ELISA Kit英文名稱:BMP8B ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體包裝5g
骨形成蛋白6(BMP6)ELISA Kit英文名稱:BMP6 ELISA Kit緊密連接蛋白20抗體包裝1g
骨形成蛋白1(BMP1)ELISA Kit英文名稱:BMP1 ELISA Kit中心體蛋白135抗體包裝5g
骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)ELISA Kit英文名稱:MUSK ELISA Kit半胱蛋白蛋白-7抗體包裝100g
骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)ELISA Kit英文名稱:TNNT1 ELISA Kit鈣調(diào)節(jié)抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào))包裝10g
骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA Kit英文名稱:TNNI2 ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框181抗體包裝25g
骨鈣(OC)ELISA Kit英文名稱:OC ELISA KitⅠ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)包裝25mg
骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)ELISA Kit英文名稱:BMPRⅡ ELISA Kit8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體包裝1g
骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)ELISA Kit英文名稱:BMPR1A ELISA Kit結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝5g
骨成型蛋白7(BMP7)ELISA Kit英文名稱:BMP7 ELISA Kit色P450 2C9抗體包裝10MG
骨成型蛋白4(BMP4)ELISA Kit英文名稱:BMP4 ELISA Kit色P450 2D6抗體包裝100g
骨成型蛋白2(BMP2)ELISA Kit英文名稱:BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗體包裝25g
特羅伊察棲砂桿菌Arenibacter│troitsensis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定早老2試劑盒乙?;邹继J;Acetyl-trans
長(zhǎng)柄鏈格孢Alternaria│longipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,合物早老1試劑盒羊藿次苷II;Icarisid II
鮑希瓦氏菌Shewanella│haliotis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白試劑盒茵芋苷;Skimmin
RSK2抑制劑(BIX 02565)突觸結(jié)合蛋白14抗體磷硫 BENFOTIAMINE(P)Human, Mouse, Rat
TATA結(jié)合蛋白TBP抗體磷硫 BENFOTIAMINE(P)Human, Mouse, Rat
微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體4,7-二-1,10-菲咯啉 BATHOPHENANTHROLINE(P)Human, Mouse, Rat
Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白TDRD3抗體浴銅靈 BATHOCUPROINE(RG)Human, Mouse, Rat
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位8A/耳聾/肌張力障礙肽抗體浴銅靈 BATHOCUPROINE(RG)Human, Mouse
跨膜蛋白158抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(SH)Human, Mouse, Rat
Tau微管蛋白激2抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(SH)Human, Mouse, Rat
谷酰轉(zhuǎn)6抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(P)Human, Mouse
跨膜蛋白59樣蛋白抗體地奧司明 DIOSMIN(BAROSMIN)(P)Human, Mouse, Rat