DprE1抑制劑(PBTZ169)

DprE1抑制劑(PBTZ169)公司*的產(chǎn)品：Anti-PDGF-R-B/FITC 熒光素標(biāo)記血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗羊IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體 Anti-E2F2 0.1ml
Mo

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：DprE1抑制劑(PBTZ169)

英文名稱：PBTZ169

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

四脊曲霉Aerococcus urinaeequi

塔賓曲霉Aeromonas media

海洋桿菌Aeromonas caviae

黑曲霉Aerococcus viridans

燦爛類芽孢桿菌Aestuariibacter aggregatus

球形芽孢桿菌Agrococcus terreus

玫瑰暗黃鏈霉菌Agrococcus lahaulensis

咸海鮮芽孢桿菌Agarivorans gilvus

雞傷寒沙門(mén)氏菌Agrococcus jejuensis

芽孢桿菌Agrococcus versicolor

貝倫格葡萄座腔菌Agromyces bauzanensis

枯草芽孢桿菌Agromyces lapidis

小孢囊桿菌Albidovulum xiamenense

塵埃芽孢桿菌Agromyces ramosus

血痕韌革菌Ahrensia kielensis

紫色小單孢菌(絳紅小單孢菌)*Alcanivorax hongdengensis

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體免疫試劑盒三磷腺苷家族蛋白2抗體人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)兒茶精水合物

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒AKIRIN1蛋白抗體人性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)兒茶沒(méi)食子

小鼠腫瘤標(biāo)志物(CA724)免疫試劑盒錨定蛋白樣蛋白1抗體人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)二氟替康

小鼠中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒腺苷激2抗體人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)二甲基姜黃
DprE1抑制劑(PBTZ169)SAMD7 英文名稱： SAMD7蛋白抗體 0.2ml

Epsin 2 英文名稱： 內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體 0.2ml

抗Jagged1/CD339抗體 Anti-CD339/Jagged1 0.1ml

Anti-Visfatin-1/PBEF1(NT) Human /FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(N端抗體)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GAB2(Ser623) 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 規(guī)格 0.1ml

CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)