商品介紹:
CC0651是一種人Cdc34泛素結(jié)合酶變構(gòu)抑制劑。CC0651有效抑制p27Kip1的泛素化,IC50為1.72μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1319207-44-7 純度:99.30% 分子量:442.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:人Cdc34泛素結(jié)合酶變構(gòu)抑制劑(CC0651)
英文名稱:CC0651
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
釀酒酵母小鼠絨毛膜促性腺激Anti-RPL7 Antibody人性休克綜合征1(TSST-1)
澳大亞平臍蠕孢大鼠可溶性P選擇Anti-RPL5 Antibody人性休克綜合征1(TSST-1)
燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎N*小鼠二Anti-RPLP2 Antibody人金葡菌腸(SE)
谷棒桿菌Ⅰ型人抗腮腺管抗體Anti-RPL7L1 Antibody人金葡菌腸(SE)
飼料類芽胞桿菌人抗軟骨抗體Anti-RPS12 Antibody人鈣聯(lián)蛋白(CNX)
松木青霉小鼠超氧化物歧化Anti-RPS11 Antibody人鈣聯(lián)蛋白(CNX)
南海芽孢桿菌大鼠S100蛋白Anti-RPS12 Antibody人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)
Xenorhabdus大鼠S100B蛋白Anti-RPS13 Antibody人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)
黃曲霉小鼠C肽Anti-RPS18 Antibody人β(BTC)
草青霉人抗人絨毛膜促性腺激抗體Anti-RPS15 Antibody人β(BTC)
膠孢大鼠白介1Anti-RPS13 Antibody人胎球蛋白A(FETU-A)
釀酒酵母小鼠熱休克蛋白糖蛋白96Anti-RPS19BP1 Antibody人胎球蛋白A(FETU-A)
假單胞菌人抗染色體抗體Anti-RPS2 Antibody人胎盤核糖核抑止劑(HPRI)
流散隱球酵母人抗腦組織抗體Anti-RPS2 Antibody人胎盤核糖核抑止劑(HPRI)
擬可可毛球二孢大鼠白介1βAnti-RPS20 Antibody人胎盤蛋白(PP)
杏鮑菇小鼠血清總補(bǔ)體Anti-RPS23 Antibody人胎盤蛋白(PP)
α微管蛋白乙酰轉(zhuǎn)移1抗體微殼色單隔胞菌大鼠心肌成纖維細(xì)胞
谷酰胺轉(zhuǎn)胺2抗體粉擬青霉(斜面)兔軟骨細(xì)胞
TANC1蛋白抗體紫花臉人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
遺傳性耳聾β-tectorin抗體繡球菌人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
人Cdc34泛素結(jié)合酶變構(gòu)抑制劑(CC0651)栗褐芽孢桿 N-乙酰-DL-
近緣彎孢 N-乙酰-L-酪乙酯
根瘤 N-乙酰-L-半胱
假單胞 絲氨
扁 D-環(huán)絲
靈芝草(靈芝屬之一種) N-乙酰-DL-絲
大腸桿 DL-絲
扣囊復(fù)膜孢酵母 D-絲
蘇云金芽孢桿 L-絲甲酯鹽酸鹽
枯草芽孢桿噬體 L-絲
馬其頓假絲酵母 BOC-Nim-芐基-L-組
平常假絲酵母 L-組鹽酸鹽一水物
釀酒酵母 L-組鹽酸鹽
蒼白空氣芽胞桿 DL-組鹽酸鹽
澳型核果褐腐病 DL-組