產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MDM2抑制劑(RG7112)
英文名稱:RG7112
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
RG7112是臨床上第一個(gè)MDM2抑制劑,Kd值為11nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):939981-39-2 別名:RO5045337 純度:99.94% 分子量:727.78 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
釀酒酵母腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體Human FSTL3(Follistatin-related protein 3) ELISA Kit胱抑F(CST7)
白側(cè)耳神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit胱抑B(CSTB/CST6/STFB)
平菇軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體Human FCN2(Ficolin-2) ELISA Kit胱抑A(CSTA/STF1/STFA)
灰黃青霉脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體Human PDGF-AB(Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA Kit胱天蛋白激活的脫氧核糖核(CAD)
胎兒別樣希瓦氏菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human FOLR1(Folate receptor alpha) ELISA Kit胱天蛋白9(Caspase-9)
釀酒酵母線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體Human FCN3(Ficolin-3) ELISA Kit胱天蛋白9(Casp-9)
干酪乳桿菌尼曼匹克C2前體蛋白抗體Human Fractalkine(Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit胱天蛋白8(Caspase-8)
黃褐曲霉煙酰腺嘌呤二核苷1抗體Human FSTL1(Follistatin-related protein 1) ELISA Kit胱天蛋白8(Casp-8)
梭菌一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)Human IL-16(Interleukin 16) ELISA Kit胱天蛋白-5(CASP5)
褐球固氮菌轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體Human IL-12(Interleukin 12) ELISA Kit胱天蛋白3(Caspase-3)
根瘤菌造血蛋白1抗體Human IL-15(Interleukin 15) ELISA Kit胱天蛋白3(Casp-3)
頂孢霉骨巢蛋白抗體Human ACTα1(Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) ELISA Kit胱天蛋白12(Casp-12)
釀酒酵母NUP54抗體Human IGF-2(Insulin-like growth factor II) ELISA Kit胱天蛋白10(CASP10)
寡養(yǎng)單胞菌屬親核β1抗體Human IGF-1(Insulin-Like Growth Factor 1) ELISA Kit胱天蛋白1(Casp-1)
柯奈尼亞小單孢菌谷受體NMDAζ1抗體Human IFNγ(Interferon gamma) ELISA Kit胱硫β-合(CBS)
炭疽芽孢桿菌谷受體NMDAζ2抗體Human GDNF(Glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA Kit胍基丁脲水解/凝集(AGMAT)
: B.13631var.2資源名稱: 乙型副傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR黃芩苷
極星交替單胞菌Alteromonas│stellipolaris 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品萊苞迪甙A
日本根霉Rhizopus│japonicus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR遠(yuǎn)志皂苷元
MDM2抑制劑(RG7112)轉(zhuǎn)化人參皂苷鞘氨單胞 PALCAM肉湯CD30分子Elisa
旋渦混合器 (便攜式) 緩沖甘油-溶液CD34分子Elisa
隱花青鵝膏 β-6'-羥基異辛可寧CD40配體Elisa
枯草芽孢桿 PBS緩沖液(PH7.4)CD45分子Elisa
蠟狀芽孢桿 乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基(LS)CD4分子Elisa
楊樹細(xì)盾霉 哥倫比亞培養(yǎng)基CD8分子Elisa
腫痂鏈霉 芐基三丁基溴化銨c-Jun氨基末端激Elisa
德爾布有孢酵母 可溶性淀粉瓊脂C-反應(yīng)蛋白Elisa
釀酒酵母 7%羊血瓊脂基礎(chǔ)D二聚體Elisa
谷氨酸棒桿Ⅳ型 雙岐桿生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基D-乳酸Elisa
釀酒酵母 淀粉水解培養(yǎng)基IIA型前膠原N末端肽Elisa
白絨紅蛋巢 (3-基)氧基硅烷III型前膠原Elisa
枯草芽孢桿 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基顆粒II型前膠原C端肽Elisa
乳桿屬 腸道增肉湯I(xiàn)型膠原Elisa
草木樨中華根瘤 微生物學(xué)接種體肉湯I(xiàn)型前膠原氨基端肽Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)