Akt抑制劑（AKT Kinase Inhibitor）

Akt抑制劑（AKT Kinase Inhibitor）公司*的產(chǎn)品：Anti-IRS-3/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素受體底物-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SGLT1 /FITC 熒光素標(biāo)記鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANGEL2

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Akt抑制劑（AKT Kinase Inhibitor）

英文名稱：AKT Kinase Inhibitor

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中生根瘤菌Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌Pichia subpelliculosa

小皮傘Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母Pichia subpelliculosa

雞傷寒沙門氏菌Pichia farinosa

黃絮鱗鵝膏菌Pichia farinosa

pGEX-2TPichia farinosa

扣囊復(fù)膜孢酵母Saccharomyces cerevisiae

氣傳原小單孢菌Saccharomyces cerevisiae

枯草芽孢桿菌Saccharomyces cerevisiae

淡紫擬青霉Saccharomyces cerevisiae

球毛殼Candida sp.

韓國基桿菌Saccharomyces cerevisiae

韓國游動(dòng)微菌Pichia anomala

尖孢鐮刀菌萎黃瓜?；?/span>Saccharomyces cerevisiae

谷棒桿菌Saccharomyces cerevisiae

小鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體人白喉抗體(Diphtheria Ab)水蘇堿

小鼠FAM84A蛋白(FAM84A)免疫試劑盒磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體人白喉抗體(Diphtheria Ab)水蘇糖

小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體人囊蟲病抗體(CYT Ab)水仙苷

小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒磷化紅陰離子交換蛋白1抗體人囊蟲病抗體(CYT Ab)水仙環(huán)
Akt抑制劑（AKT Kinase Inhibitor）SNAP29 英文名稱： 突觸相關(guān)蛋白29抗體 0.2ml

EAF2 英文名稱： 睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和抑制基因抗體 0.2ml

克拉拉細(xì)胞蛋白(Clara細(xì)胞分泌蛋白)抗體 Anti-CC16 0.1ml

Anti-URGCP/URG4/FITC 熒光素標(biāo)記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Thr18) 磷酸化組蛋白H1.4抗體 規(guī)格 0.1ml

CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg