公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ALK1/ALK2抑制劑(ML347)
英文名稱:ML347
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ML347(DN193719)是ALK1/ALK2選擇性抑制劑,IC50分別為46/32nM,比對ALK3的抑制性高300倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1062368-49-3 別名:LDN 193719 純度:99.94% 分子量:352.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
紅球菌人蛋白激BBacillus licheniformis小鼠膠原I(Collagenase I)
貝葉多孔菌人血紅氧合2Bacillus licheniformis小鼠磷化蛋白激C(P-PKC)
黑曲霉人激M2型同工Bacillus licheniformis小鼠磷化蛋白激C(P-PKC)
白黃小脆柄菇人甲狀腺過氧化物Bacillus licheniformis小鼠磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)
彩色豆馬勃人αL巖藻糖苷Bacillus licheniformis小鼠磷化外信號調(diào)節(jié)激(pERK)
弗分枝桿菌人內(nèi)皮型一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)
臘狀芽胞桿菌人血紅氧合1Bacillus licheniformis小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)
戊糖乳桿菌人誘導型一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
香菇人磷脂A2Bacillus licheniformis小鼠轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
豬鏈球菌人一氧化氮合成Bacillus licheniformis小鼠骨形成蛋白(BMPs)
乳乳球菌NZ9000人端粒Bacillus licheniformis小鼠骨形成蛋白(BMPs)
色串孢人基質(zhì)金屬蛋白5Bacillus licheniformis小鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
褐球固氮菌人基質(zhì)金屬蛋白4Bacillus licheniformis小鼠視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)
波卓鏈霉菌人基質(zhì)金屬蛋白9/明膠BBacillus megaterium小鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
肺炎鏈球菌人神經(jīng)特異性烯化Bacillus megaterium小鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
黑曲霉人肌激同工MBBacillus licheniformis小鼠戊糖(Pentosidine)
鋅指蛋白ZBTB8A抗體薄花邊傘8-3倉鼠卵巢細胞,二氫葉還原缺陷
鋅指蛋白916B抗體灰葡萄孢菌人視網(wǎng)膜上皮細胞
鋅轉(zhuǎn)運體8蛋白抗體總狀毛霉小鼠心房肌細胞
鋅指蛋白503抗體鐮刀菌屬中國倉鼠卵巢細胞
ALK1/ALK2抑制劑(ML347)食奎尼酸沙雷氏 (-)-白雀木
摩根氏 八氫姜黃
皮氏羅爾斯通氏 白楊-7-葡萄糖酸苷
寄生曲霉 半齒澤蘭
桔黃糖多孢 苯并黃
棘孢小單孢 巴馬亭紅堿
三葉草根瘤 巴馬亭紅堿
大腸埃希 白蠟樹精
嗜鹽咸海鮮球 白花前胡E
青霉 二酸
間型彎孢 檳榔次堿
楊奇青霉 苯甲
F---21(金針菇) 扁桃酸
雞傷寒沙門氏 胞嘧啶
葡萄座腔 扁塑藤