商品介紹:
Eptifibatide為抗血小板化合物,是糖蛋白IIb/IIIa抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):188627-80-7 別名:MPA-HAR-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2;{MPA}{HAR}GDWPC-NH2 純度:99.18% 分子量:831.96 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
甘露聚糖結(jié)合凝集關(guān)聯(lián)絲蛋白1(MASP1)ELISA Kit英文名稱:MASP1 ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝1g
甘脫氫(GLDC)ELISA Kit英文名稱:GLDC ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝25g
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA Kit英文名稱:CRT ELISA Kit磷化CREB-1抗體包裝5g
鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPB2(ATP2B2)ELISA Kit英文名稱:ATP2B2 ELISA Kit磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g
鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPA2(ATP2A2)ELISA Kit英文名稱:ATP2A2 ELISA Kit磷化N-鈣粘附分子抗體包裝25g
鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)ELISA Kit英文名稱:iPLA2 ELISA Kit磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體包裝5g
鈣蛋白抑制蛋白(CAST)ELISA Kit英文名稱:CAST ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100g
鈣蛋白10(CAPN10)ELISA Kit英文名稱:CAPN10 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝25g
鈣蛋白1(CAPN1)ELISA Kit英文名稱:CAPN1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框75抗體包裝25ml
復(fù)制啟動(dòng)因子1(REPIN1)ELISA Kit英文名稱:REPIN1 ELISA KitCD4抗體包裝5ml
輔肌動(dòng)蛋白α2(ACTN2)ELISA Kit英文名稱:ACTN2 ELISA Kit血小板糖蛋白GPIb抗體包裝1g
封閉蛋白3(CLDN3)ELISA Kit英文名稱:CLDN3 ELISA Kit蛋白精N基4抗體包裝1g
封閉蛋白2(CLDN2)ELISA Kit英文名稱:CLDN2 ELISA Kit磷化蛋白精N基4抗體包裝25g
分泌性白細(xì)胞蛋白抑制因子(SLPI)ELISA Kit英文名稱:SLPI ELISA Kit磷化周期依賴性激6抗體包裝5g
分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)ELISA Kit英文名稱:SFRP5 ELISA Kit磷化原癌基因CBL2抗體包裝100mg
細(xì)鏈格孢Alternaria│tenuis Nees 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白A4試劑盒遠(yuǎn)華蟾蜍精;ocinobufagi
小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,無載脂蛋白A2試劑盒氧化槐定堿;Oxysophoridine
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白A1試劑盒薏苡;Coixol
糖蛋白IIb/IIIa抑制劑(Eptifibatide)突觸生長(zhǎng)相關(guān)蛋白抗體一枝黃花(標(biāo)準(zhǔn)品) Chlorhexidine Acatate
NDUFA9蛋白抗體伊貝母(新疆貝母)(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclopenthiazide
間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰丁香酚 L-Methyldopa
磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體乙酰杠柳寡糖C L-Methyldopa
核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體乙酰哈巴苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Mefenamic acid
心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體乙?;邹继J(標(biāo)準(zhǔn)品) Potassium iodide
指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體乙酰黃芪皂苷I Azathioprine
核小體結(jié)合蛋白1抗體乙酰升麻-3-O-α-L-阿拉伯糖苷 Artesunate
軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體乙酰紫草 Artesunate