以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Abacavir(ABC)硫酸鹽是核苷類似物逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI),可用于HIV和AIDS。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:188062-50-2 別名:Abacavir Hemisulfate;ABC sulfate 純度:99.81% 分子量:286.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
鳳仙萜四苷A英文名稱: Cytochalasin B組蛋白基化KMT3B抗體(雄激受體激活蛋白)包裝100g
鳳仙萜四苷B英文名稱: Fumagillin from Aspergillus fumigatus離子通道蛋白Kv4.3抗體包裝25g
鳳仙萜四苷C英文名稱: Oligomycin B from StreptomycesKillin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體包裝5g
鳳仙萜四苷F英文名稱: Patulin from Penicillium expansum賴tRNA的連接抗體包裝5MG
鳳仙萜四苷G英文名稱: 3-Bromobenzophenone220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體包裝25g
鳳仙萜四苷K英文名稱: Flumequine 磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體包裝5g
鳳仙萜四苷M英文名稱: Flumequine 基爾曼氏細(xì)小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端包裝5mg
佛手(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxolinic acid離子通道蛋白家族KCNQ1抗體包裝100g
佛手柑內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sterigmatocystin from Aspergillus Versicolor組蛋白H3 K9基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
佛手柑;香檸檬;佛手柑亭;香檸檬亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nigericin sodium生物鐘KAT13D蛋白抗體包裝5g
佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NonactinKelch樣蛋白36抗體包裝1g
呋拉茶堿英文名稱: Trichostatin A from Streptomyces sp離子轉(zhuǎn)運蛋白KCC4抗體包裝250mg
弗朗鼠李皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acetovanillone磷化離子通道蛋白Kv1.3抗體包裝1g
扶芳藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Acetovanillone離子通道蛋白家族成員4抗體包裝5g
茯苓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polydatin電壓門控性通道蛋白亞基kv5.1抗體包裝250mg
病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR抗增殖核抗原試劑盒廣藿香;Pogostone
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗硬皮病抗體70試劑盒骨化三;Calcifediol
芽孢桿菌Bacillus│atrophaeus 質(zhì)量規(guī)格:CP抗抑制B抗體試劑盒骨化二;Calcifediol
逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Abacavir sulfate)原鈣粘蛋白γA3抗體佐,對乙酯 Tussilago farfara, ext.
血小板源性生長因子BB抗體佐鹽鹽 NISTOSE
胰島促進因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白)吡貝地爾 4'-Hydroxyacetophenone
乙?;?/span>P53(Lys382)抗體吡拉西坦 3,29-Dibenzoyl rarounitriol
磷化過氧化活化增生受體γ抗體吡羅昔康 TAUROHYODEOXYCHOLIC ACID SODIUM SALT
磷化腫瘤抑制因P53抗體吡嘧司特 HSPC;Lecithins Hydrogenated
腺苷環(huán)化激活肽受體1抗體吡噻硫;奧替普拉 Streptomycin
關(guān)節(jié)炎相關(guān)因抗體芐氟噻 TENOVIN-1
血小板活化因子抗體別嘌 neomycin