p53-MDM2抑制劑(Nutlin 3)

p53-MDM2抑制劑(Nutlin 3)公司*的產(chǎn)品：Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化周期B1抗體IgG十六烯 99%
Cyclin C/FITC 熒光標(biāo)記周期C抗體IgG十六烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ,≥99.8% (GC)
Cyclin D1/FITC 熒光標(biāo)記周期D1蛋白抗體對苯二 AR
Phospho-Cyclin D1 (T

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：p53-MDM2抑制劑(Nutlin 3)

英文名稱：Nutlin 3

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

短小芽孢桿菌FSH 禽類聯(lián)免疫Anti-L1CAM Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)

艾比湖嗜鹽堿紅菌LH 禽類聯(lián)免疫Anti-LAIR2 Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)

枯草芽孢桿菌PRL 禽類聯(lián)免疫Anti-LAMA4 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)

釀酒酵母魚雌二Anti-LAMA5 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)

指狀游動放線菌大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白Anti-LAMA1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)

蘋果盤二孢菌*兔子腫瘤壞死因子αAnti-LAMB1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)

鏈格孢小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-LAMB2 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)

解淀粉芽孢桿菌人胸腎表達(dá)趨化因子Anti-LAMB3 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)

釀酒酵母人B-淋巴趨化因子Anti-LAMP3 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)

蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種小鼠磷脂酰絲Anti-LATS1 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)

赤紅球菌兔子轉(zhuǎn)化生長因子βAnti-LATS1 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)

Pseudohaliea rubra魚促腎上腺皮質(zhì)激Anti-LAMC3 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)

尤韋可擬盤多毛孢大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子Anti-LDLRAD1 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)

廈門假單胞菌人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒Anti-LDB2 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)

褐球固氮菌（可訂購）小鼠磷甘油酯Anti-LDB1 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)

味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)大鼠乙酰轉(zhuǎn)移Anti-LDLRAD2 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)

維甲受體γ抗體粗壯假絲酵母人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

Ras相關(guān)區(qū)域家族蛋白4抗體擬熱帶假絲酵母人乳腺癌細(xì)胞(耐阿霉)

細(xì)胞生長抑制蛋白34馬其頓假絲酵母人胃癌順鉑耐藥

Ras樣蛋白家族10A抗體郎比可假絲酵母人結(jié)腸癌細(xì)胞
p53-MDM2抑制劑(Nutlin 3)蘇云金芽胞桿 鳶尾酮

大腸桿 Hythiemoside A

鹽漬鹽單胞 Hirsutenone

泡盛曲霉 Hirsutanonol

間座殼 醋酸獨活屬

大腸埃希氏 Heraclenol 3'-O-beta-D-glucopyra

小單孢 鞭打繡球苷 B

金頭曲霉 異栓翅芹

近玫瑰色近藤氏酵母 異藤黃氧蒽酮 E

釀酒酵母 異莪術(shù)二烯

粘紅酵母 Isocupressic acid

異常漢遜酵母異常變種 異姜花D

釀酒酵母 Helichrysetin

熱噬淀粉芽孢桿 Hedyotisol A

腐皮鐮孢 果藥烯酮