商品介紹:
Danshensu是丹參的有效成分,能夠激活Nrf2信號通路,保護(hù)心血管。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:76822-21-4 別名:Dan shen suan A;Salvianic acid A 純度:98.0% 分子量:198.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
嗎啉惡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Caffeic acid磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g
嗎貝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Caffeic acid微管結(jié)合蛋白CYLD抗體包裝100g
嗎替麥考酚酯/霉酚酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Caffeic acid磷化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體包裝25g
麥白霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neomycin sulfate磷化CBX5抗體包裝5g
麥迪霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neomycin sulfate霉抗體包裝100mg
麥芽三糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diphenhydramine hydrochloride磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g
麥芽糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Diphenhydramine hydrochloride磷化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體包裝500mg
沒食子乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Polyinosinic acid磷化周期依賴激2抗體包裝100g
霉酚; 麥考酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mildronate,Meldonium磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝25g
美(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mildronate,Meldonium磷化周期依賴性激2抗體包裝5g
美羅培南(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carrageenan質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體包裝25g
美洛西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pranlukast3號染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
美洛昔康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Metoprolol tartrateCD134抗體包裝1g
美索巴莫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Metoprolol tartrate單核趨化蛋白5抗體包裝5g
美他多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Arabic gum髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體包裝100g
優(yōu)雅食烷菌Alcanivorax│venustensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品色C-1試劑盒甜菊糖;Stevioside
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR色b561試劑盒特女貞苷;Specnuezhenide
假單胞菌屬Pseudomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品絨毛蛋白/埃茲蛋白試劑盒β-蛻皮激;Hydroxyecdyso
Nrf2信號通路激活劑(Danshensu)小鼠骨保護(hù)(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人CXC趨化因子受體1山柰(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
人XC趨化因子受體1山柰酚-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷Human
小鼠B因子山柰酚-3-O-槐二糖-7-O-葡萄糖苷Human, Mouse, Rat
大鼠同型半胱山柰酚-3-O-龍膽二糖苷Human
小鼠抑瘤M山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
大鼠糖皮質(zhì)激受體β山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Human, Mouse, Rat
人二級淋巴組織趨化因子山香圓葉(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白山藥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse