產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p53和MDM2相互作用抑制劑
英文名稱:p53 and MDM2 proteins-interaction-inhibitor chiral
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
手性p53and MDM2proteins-interaction-inhibitor是p53和MDM2相互作用的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):939981-37-0 別名:p53 inhibitor (chiral) 分子量:734.75 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(AIL)ELISA試劑盒 ,英文名: AIL ELISA Kit
犬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/DLA)ELISA檢測(cè)試劑盒Caninemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/DLAELISAKit 96T/48T
犬松弛肽/松弛素(RLN)免疫試劑盒 Canine Relaxin,RLN ELISA Kit
英文名稱HumanadiponectinELISAKit人脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解樣品制備試劑盒50次
RatHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素17F(IL17F)ELISA試劑盒 ,英文名: IL17F ELISA Kit
人前列腺素F(PGF)ELISA檢測(cè)試劑盒humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 96T/48T
大鼠精氨酸(Arg)免疫試劑盒 Rat arginine,Arg ELISA kit
英文名稱RatAmyloid-β-Protein(1-40)ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)規(guī)格:96T/48T
聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒10次
ELISAKitHSP-20人熱休克蛋白20規(guī)格:48T/96T
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thyroxine binding globulin (TBG) ELISA Kit 人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒
guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAmylinELISAKit大鼠胰淀素規(guī)格:48T/96T
血液谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
p53和MDM2相互作用抑制劑SREBP-1 英文名稱: 膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
FASN 英文名稱: 脂肪酸合成酶抗體 0.1ml
鼠抗人血清白蛋白單克隆抗體 Anti-Mouse anti-human HAS 0.1ml
Anti-SCG3/SgIII /FITC 熒光素標(biāo)記分泌粒蛋白Ⅲ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 規(guī)格 0.1ml
rDen-2(rh-Dengue Virus) 重組人登革熱病毒2型診斷抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 100ug
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)