CDK抑制劑(Purvalanol A)

CDK抑制劑(Purvalanol A)公司正在出售的產(chǎn)品：IL-17E/IL-25/FITC 熒光標(biāo)記白介-17E抗體IgG苯磺酰肼 98%
IL-17F/IL-24/FITC 熒光標(biāo)記白介-17F抗體IgGT 三水合物 AR,99.0%
IL-18R Alpha/FITC 熒光標(biāo)記白介-18受體α鏈抗體IgG對(duì)苯磺酯 98%
IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

戊糖片球菌*大鼠堿性成纖維生長因子Anti-S100A3 Antibody人凝血(TM)

羅伊氏乳桿菌小鼠補(bǔ)體片斷3aAnti-S100A7L2 Antibody人Ⅶ(FⅦ)

熱噬淀粉芽孢桿菌人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體Anti-S1PR1 Antibody人Ⅶ(FⅦ)

枯草芽孢桿菌大鼠巨噬炎癥蛋白5Anti-S100Z Antibody人可溶性白抗原G(sHLA-G)

白黃小脆柄菇小鼠17羥孕Anti-SAA4 Antibody人可溶性白抗原G(sHLA-G)

假木豆根瘤菌人抗Sa抗體Anti-S1PR4 Antibody人凝血原(PT)

土星漢遜酵母人抗神經(jīng)元核抗體2型/抗Ri抗體Anti-SAE1 Antibody人凝血原(PT)

蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)小鼠間粘附分子1Anti-SAR1B Antibody人補(bǔ)體因子D(CFD)

天藍(lán)色鏈霉菌小鼠卵泡抑Anti-SCAF1 Antibody人補(bǔ)體因子D(CFD)

粘紅酵母大鼠可溶性血管粘附分子1Anti-Sam 68 Antibody人血漿纖維連接蛋白(pFN)

淺黃小孢絲鏈霉菌人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體Anti-SARNP Antibody人血漿纖維連接蛋白(pFN)

彎孢菌小鼠組織蛋白去乙?；?/span>Anti-SAMHD1 Antibody人纖維連接蛋白(cFn)

釀酒酵母人抗Q熱抗體Anti-SCAF4 Antibody人纖維連接蛋白(cFn)

藤黃節(jié)桿菌小鼠雌三Anti-SCAF4 Antibody人總蛋白S(TPS)

巨大芽孢桿菌大鼠免疫球蛋白AAnti-SCAMP1 Antibody人總蛋白S(TPS)

肉褐鱗環(huán)柄菇小鼠雄烯二Anti-SCAF4 Antibody人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)

硫氧還蛋白5抗體蟬花1-4（蟬擬青霉）（斜面）抗人微管a蛋白單抗7

轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體裂殖酵母抗人TATA框結(jié)合蛋白交互作用蛋白單抗7

糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體茄腐鐮刀菌抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白單抗7

胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成-1抗體人厚垣普奇尼亞菌抗人肝癌單抗F117
CDK抑制劑(Purvalanol A)側(cè)耳 覆盆子酮葡萄糖苷

釀酒酵母 L-脯甲酯鹽酸鹽

Paraburkholderia sp. 二鈉

大豆慢生根瘤 L-苯甘乙酯鹽酸鹽

毛木耳 兒茶精水合物

香菇 L-苯甘甲酯鹽酸鹽

根瘤 對(duì)羥基苯酸

解脂亞羅酵母 短葉蘇木酸

球毛殼 L-苯乙酯鹽酸鹽

蠟狀芽孢桿 地骨皮甲

皺木耳 L-苯甲酯鹽酸鹽

粉紅單端孢 燈盞花乙甲酯

圍小叢殼 L-甲硫乙酯鹽酸鹽

草木樨中華根瘤 草夾竹桃苷

pSV-Beta-Gal  蒼術(shù)苷鹽