產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):EGFR抑制劑(Pelitinib)
英文名稱(chēng):Pelitinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Pelitinib(EKB-569;WAY-EKB569)是可逆的EGFR抑制劑,IC50值為38.5nM。也可輕微抑制Src,MEK/ERK和ErbB2,IC50值分別為282,800,和1255nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):257933-82-7 別名:EKB-569;WAY-EKB 569 純度:98.65% 分子量:467.92 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
根瘤菌人免疫球蛋白E Fc段受體ⅡAnti-LILRB5 Antibody人抑制β-B(Inhbb)
唐菖蒲青霉大鼠抗紅抗體Anti-LILRB2 Antibody人抑制β-B(Inhbb)
冷變紫薄層菌人免疫球蛋白G Fc段受體ⅢAnti-LILRB1 Antibody人食欲受體(OXR)
粉紅單端孢霉魚(yú)卵黃高磷蛋白Anti-LILRB4 Antibody人食欲受體(OXR)
就地堆肥地芽孢桿菌兔核因子κB亞基p65親和肽Anti-LIM Kinase Antibody人生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)
克魯維畢赤酵母克魯維變種乙型肝炎二對(duì)半全套Anti-LIMK2 Antibody人生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)
鏈霉菌大鼠CD3分子Anti-LMO3 Antibody人鈣調(diào)(CAM)
弗氏檸檬桿菌小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體Anti-LMO4 Antibody人鈣調(diào)(CAM)
柱形孢鏈霉菌乙型肝炎二對(duì)半全套(立可讀)Anti-LIPI Antibody人真胰島(TI)
有柄樹(shù)舌靈芝(白芝)乙型肝炎表面抗原Anti-LMTK3 Antibody人真胰島(TI)
休哈塔假絲酵母乙型肝炎表面抗體Anti-LONP2 Antibody人重去甲腎上腺(NE-B)
土生隱球酵母乙型肝炎e抗原Anti-LPAR3 Antibody人重去甲腎上腺(NE-B)
多形布勒擔(dān)子酵母乙型肝炎e抗體Anti-LOX Antibody人前列環(huán)(PGI)
米曲霉乙型肝炎核心抗體Anti-LMX1B Antibody人前列環(huán)(PGI)
中慢生華癸根瘤菌乙型肝炎表面抗原Anti-LPAR3 Antibody人降鈣原(PCT)
屎腸球菌乙型肝炎表面抗體Anti-LPAR5 Antibody人降鈣原(PCT)
核糖體結(jié)合蛋白1抗體束狀刺盤(pán)孢正常人肝細(xì)胞
核糖體蛋白L5抗體多主枝孢大鼠施旺細(xì)胞
神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白抗體圓酵毛殼人膜膜間皮細(xì)胞
DNA修復(fù)和重組蛋白R(shí)AD54B抗體琥珀毛殼小鼠肥大細(xì)胞
EGFR抑制劑(Pelitinib)米曲霉 薔薇酸,'野鴉椿酸
多主葡萄殼 桉脂
枯草芽孢桿枯草亞種 桉樹(shù)
孟氏假單胞 Ethyl β-D-fructofuranoside
樹(shù)舌5-2 去羥加果酸
Bacillus aryabhattai Erythrinin C
細(xì)鏈格孢 Ervamycine
云芝 麥角甾-5,24(28)-二烯-3,7,16-三
單梗頭孢霉屬 Epitaraxerol
谷棒桿 表千金藤默星堿
米曲霉 beta-D-吡喃葡萄糖等效-9-羥基-15-氧代-16-貝殼杉烯-19-酸酯
簡(jiǎn)單芽孢桿 ent-6,9-Dihydroxy-15-oxokaur-16-
耶爾森氏屬 11,15-二羥基-16-貝殼杉烯-19-酸
枯草芽孢桿 英西林
解脂耶氏酵母 五加甙 C
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)