商品介紹:
CBR-5884是PHGDH的抑制劑,IC50是33uM,能夠在癌癥細(xì)胞中減少絲氨酸合成,能夠抑制癌細(xì)胞的擴(kuò)散和擾亂PHGDH的低聚狀態(tài)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):681159-27-3 純度:98.90% 分子量:336.39 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PHGDH抑制劑(CBR-5884) | 3-Phosphoglycerate dehydrogenase inhibitor | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鉆特省芽孢桿菌類固受體激活蛋白3抗體Human FAS(Tumor necrosisfactor receptor superfamily member 6) ELISA Kit(GSH)
EC600*軸突導(dǎo)向因子1抗體Human FASL(Factor Related Apoptosis Ligand) ELISA Kit谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)
塔賓曲霉酪激B抗體Human FETUA(Fetuin A) ELISA Kit谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)
巴氏醋桿菌跨膜受體蛋白Notch-3抗體Human FGF19(Fibroblast growth factor 19)谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)
巴氏生孢八疊球菌中性粒彈性蛋白ELANE抗體Human FGF7(Fibroblast growth factor 7) ELISA Kit谷脫羧65(GAD65)
根瘤菌型肝炎病NS4B(65kDa)抗體Human FGF21(Fibroblast growth factor 21) ELISA Kit谷脫羧(GAD)
嗜冷桿菌神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體Human FGF9(Fibroblast growth factor 9) ELISA Kit谷脫氫(GDH/GLDH)
紫晶臘蘑死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體Human FGF4(Fibroblast growth factor 4) ELISA Kit谷受體(NMDAR)
淡紫擬青霉神經(jīng)絲蛋白抗體Human FN1(Fibronectin) ELISA Kit谷-半胱連接調(diào)節(jié)亞基(GCLM)
微管螺旋鏈霉菌磷化核因子抗體Human FCN1(Ficolin-1) ELISA Kit谷[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)
仰光鏈霉菌跨膜受體蛋白Notch-1抗體Human CHI3L1(Chitinase-3-like protein 1) ELISA Kit孤腓肽(OFQ/N)
鐮刀菌屬磷化核受體Rev-Erbα抗體Human DCN(Decorin) ELISA Kit鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)
鴨疫里氏桿菌雞新城疫病抗體Human CST3(Cystatin C) ELISA Kit鉤端螺旋體IgG(Leptospira)
粘質(zhì)沙雷氏菌還原型輔Ⅱ/磷酰腺嘌呤二核苷抗體Human SLAM/CD150(Signaling Lymphocytic Activation Molecule) ELISA Kit鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)
塔里木類芽孢桿菌NIT2蛋白抗體Human c-MET(Hepatocyte growth factor receptor) ELISA Kit睪受體(TR)
鱈鹽球菌神經(jīng)分化因子1抗體Human C5a(Complement Component 5a) ELISA Kit睪(Testoterone)
犁頭霉Absidia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR大豆苷
腸炎沙門氏菌Salmonella│enteritidis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑黃豆黃
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)黃豆黃苷
PHGDH抑制劑(CBR-5884)Brevibacillus parabrevis 5-氨基-1-戊表皮生長因子Elisa
克魯斯假絲酵母 聚(9-乙烯咔唑)氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa
紅托竹蓀 5-溴-2-甲氧基苯甲二Elisa
硬結(jié)節(jié)桿 原丁酸三乙酯補(bǔ)體成分5Elisa
伯克霍爾德氏 烯基磺酸鈉補(bǔ)體蛋白3Elisa
鮮綠青霉 甲基烯酸芐基酯補(bǔ)體蛋白4Elisa
丁酸梭 L-蛋氨酸甲酯鹽酸鹽補(bǔ)體片斷3aElisa
釀酒酵母 1-環(huán)已基-2-嗎啉乙基碳二亞對(duì)甲苯磺酸鹽不對(duì)稱二甲基精氨酸Elisa
香菇 氧硅烷層粘連蛋白Elisa
鐮刀屬 4-氨基-3-甲酸超敏C反應(yīng)蛋白Elisa
枯草芽孢桿 三超氧化物歧化Elisa
粘孢白僵 1,3-二(4-氨苯氧基)苯成纖維生長因子Elisa
雞白痢雞傷寒多價(jià)染色平板凝集抗原參照品 酚紅煌綠瓊脂成纖維生長因子23Elisa
比基尼鏈霉 YPD液體培養(yǎng)基雌二Elisa
黃色桿屬 檢定培養(yǎng)基1號(hào)(低PH)促甲狀腺Elisa