公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制劑(Ofloxacin)
英文名稱(chēng):Ofloxacin
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Ofloxacin是氟喹諾酮類(lèi)抗生素,可抑制細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):82419-36-1 純度:98.00% 分子量:361.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
杠柳苷元;杠柳苷元;無(wú)杠柳苷苷元英文名稱(chēng): N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide磷化KLF5抗體包裝1g
杠柳寡糖B英文名稱(chēng): A771726 (Teriflunomide)特異性離子通道蛋白抗體包裝5g
杠柳寡糖C英文名稱(chēng): Angeloylgomisin H沉默驅(qū)動(dòng)蛋白KIF4A抗體包裝1g
高車(chē)前苷英文名稱(chēng): MethyltrienoloneATP敏感離子通道蛋白抗體包裝25g
高車(chē)前英文名稱(chēng): Crotamiton KIAA1462蛋白抗體包裝5g
高麗紅參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): ChlorosulfuronKIAA1549蛋白抗體包裝25MG
高麗槐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Sepiapterin基爾曼氏細(xì)小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端包裝100g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): MotesanibKelch樣蛋白20抗體包裝25g
高良姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sciadopitysin激肽釋放抑制劑抗體包裝500g
尖杉酯堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 10-Hydroxy-2-decenoic acidkelch樣蛋白7抗體包裝5g
高山紅景天(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): AST-1306 mesylateTWIK相關(guān)敏感離子通道蛋白9抗體包裝1g
高烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Laropiprant,MK-0524激肽釋放6抗體包裝250mg
高香草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ceftiofur hydrochloride激肽釋放8抗體包裝50mg
膏桐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ceftiofur hydrochloride血漿激肽釋放抗體包裝25g
藁本(遼藁本)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): zafirlukast磷化抑癌蛋白EZH2抗體包裝5g
南海海棲菌Oceanicola│nanhaiensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP,BR抗血小板抗體IgM試劑盒甘松新;Nardosinone
玫瑰色鮮艷菌Roseivivax│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗血小板抗體IgG試劑盒光翠雀堿; denudatine
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR抗血小板抗體IgA試劑盒甘油三油酯;Triolein
細(xì)菌DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制劑(Ofloxacin)原鈣粘附蛋白1抗體鹽 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α1抗體鹽利托君 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α3抗體鹽硫利達(dá) Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α4抗體鹽魯拉西 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α5抗體 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α9抗體米帕明/咪 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α7抗體鹽羅 Silica gel for column chromatography
原鈣粘附蛋白α8抗體鹽羅替戈汀 Silica gel for column chromatography
絲蛋白10抗體鹽洛貝林 Silica gel for column chromatography