商品介紹:
TMC647055膽堿鹽是一種細(xì)胞滲透性的,選擇性HCV NS5B抑制劑,評(píng)估病毒RdRp引物依賴(lài)性轉(zhuǎn)錄測(cè)定中,平均IC50為34nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 分子量:727.91 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HCV NS5B抑制劑(TMC647055 Choline salt)
英文名稱(chēng):TMC647055 Choline salt
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
特女貞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Aprotinin缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體包裝100ml
藤合歡(南蛇藤果)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): E64人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗包裝25ml
藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Azilsartan Medoxomil人乙型肝炎表面抗原單克抗體(檢測(cè))包裝500ml
藤黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): α-Amylase人乙型肝炎e抗原單克(包被)抗體包裝5g
替寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chymotrypsin人乙型肝炎e抗原單克(檢測(cè))抗體包裝25g
天花粉(栝樓)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acetyl coenzyme A trilithium salt小鼠抗人血紅蛋白單克抗體包裝5g
天麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Urease型流感病血凝抗體包裝1g
天麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Protease type VIII磷化HER2受體抗體包裝5g
天名精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triamcinolone Acetonide組蛋白去乙酰化4抗體包裝1g
天南星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Triamcinolone Acetonide磷化HER2受體抗體包裝5g
天山雪蓮 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): β-NADH.hydrate磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝1g
天仙藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Suramin sodiumHLA-DR抗體包裝5g
甜菜堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Elastase, pancreatic from porcine pancreas人類(lèi)白抗原G抗體包裝1g
甜茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Lipase高遷移率族蛋白A2抗體包裝1g
甜茶苷;甜葉懸鉤子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Xylanase from Trichoderma viride 高遷移率族蛋白B1抗體包裝25g
型副傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99%膜聯(lián)蛋白Ⅲ試劑盒L-亮 ;L-Leucine
分散泛菌Pantoea│dispersa 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR膜聯(lián)蛋白Ⅱ試劑盒硫基葡萄糖;Glucosamine
牡丹枝孢(牡丹葉霉病菌)Cladosporium│paeoniae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品膜聯(lián)蛋白Ⅰ試劑盒辣椒堿;Capsaicin
HCV NS5B抑制劑(TMC647055 Choline salt)胰腺衍生因子抗體蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品) Indoxyl-Glucuronide
性成纖維生長(zhǎng)因子抗體兒茶(兒茶)(標(biāo)準(zhǔn)品) Iodobenzene
8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體兒茶沒(méi)食子酯 Iron (II) sulfide
8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體二庚烷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Iron (II,III ) oxide
Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白二羥茶(標(biāo)準(zhǔn)品) Iron (III) oxide
胰腺衍生因子抗體二氫丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品) ron powder reduced
補(bǔ)體因子H抗體二氫辣椒(標(biāo)準(zhǔn)品) Isophorone
磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isovanillin
Fas相關(guān)1因子抗體二氫歐山芹當(dāng)歸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Isovanillin