Pim激酶抑制劑(SMI-16a)

商品介紹：
SMI-16a是選擇性的Pim激酶抑制劑，對Pim1，Pim2和PC3細胞的IC50值分別為0.15，0.02和48μM。
注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！
CAS號：587852-28-6
別名：PIM1/2 Kinase Inhibitor VI
純度：98.0%
分子量：263.31
儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

前動力蛋白2(PK2)ELISA Kit英文名稱：PK2 ELISA Kit周期依賴性激7抗體包裝1g

前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9(PCSK9)ELISA Kit英文名稱：PCSK9 ELISA Kit周期依賴性激8抗體包裝25g

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)ELISA Kit英文名稱：GLUT4 ELISA Kit周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體包裝5g

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GLUT2)ELISA Kit英文名稱：GLUT2 ELISA KitⅡ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體包裝1g

葡萄糖苷β(GUSβ)ELISA Kit英文名稱：GUSβ ELISA Kitc-fos抗體包裝25g

葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)ELISA Kit英文名稱：GPI ELISA Kit嗜鉻粒A抗體包裝5g

平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)ELISA Kit英文名稱：ACTα2 ELISA KitCGRP降鈣基因相關(guān)肽抗體包裝500mg

皮質(zhì)(CORT)ELISA Kit英文名稱：CORT ELISA KitChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移抗體包裝1g

皮質(zhì)結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit英文名稱：CBG ELISA Kit周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g

皮膚橋蛋白(DPT)ELISA Kit英文名稱：DPT ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體包裝1g

旁血小板溶蛋白(PPL)ELISA Kit英文名稱：PPL ELISA Kit抗菌肽/天蠶抗體包裝5g

紐蛋白(VCL)ELISA Kit英文名稱：VCL ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗體包裝25g

牛血清白蛋白(BSA)ELISA Kit英文名稱：BSA ELISA Kit表面趨化因子受體8抗體包裝5g

Ⅻ(F12)ELISA Kit英文名稱：F12 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員2抗體包裝250mg

ⅩⅢB肽(F13B)ELISA Kit英文名稱：F13B ELISA Kit胱硫γ裂解抗體包裝1g

炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6試劑盒植鋅;Zinc Phytate

假結(jié)核耶爾森氏菌Yersinia│pseudotuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：>98% 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1試劑盒植鈉;Sodium phytate

擬諾卡氏菌Nocardiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% ,標準品腫瘤壞死因子受體超家族成員18試劑盒植鈣;Calcium phytate
Pim激酶抑制劑(SMI-16a)糖轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體姜黃（標準品） Fluazifop-P-butyl solution

環(huán)指蛋白27抗體姜（標準品）  Famoxadone solution

透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體降二氫辣椒 Flufenoxuron

G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體降香（標準品） Fomesafen

Rho GTP激活蛋白26抗體膠蒼術(shù)甙，羧蒼術(shù)苷二鹽(標準品) Flutolanil

G蛋白α抑制蛋白1抗體焦地黃乙甙A1 Flusilazole

生長停滯特異性蛋白6抗體焦地黃乙甙B1 Fipronil

谷胱甘肽合成抗體焦性沒食子（標準品） Fenobucarb

血型糖蛋白δ抗體絞股藍（標準品） Fenpyroximate