DGAT/COX-1和COX-2抑制劑(Xanthohumol)

DGAT/COX-1和COX-2抑制劑(Xanthohumol)公司正在出售的產(chǎn)品：Nm23/FITC 熒光標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因抗體IgG4-羥苯異丁酯 99%
Nm23-H1/FITC 熒光標(biāo)記腫瘤抑制因抗體IgG4-羥苯異酯 99%
Nm23-H2/FITC 熒光標(biāo)記腫瘤抑制因抗體IgG尼泊金酯 AR,99.0%
Nociceptin/FITC 熒光標(biāo)記孤菲肽/痛敏肽抗體IgG尼泊金酯

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

暗色環(huán)紋炭團(tuán)菌人紐蛋白Bacillus sp.小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)

球形節(jié)桿菌人軸突生長(zhǎng)誘向因子4Bacillus sp.小鼠己糖激(HK)

釀酒酵母人軸突生長(zhǎng)誘向因子1Bacillus sp.小鼠己糖激(HK)

米曲霉人硫腦苷酯Bacillus sp.小鼠脫氫E1(PDH E1)

枯草芽孢桿菌人再生基因蛋白IVBacillus sp.小鼠脫氫E1(PDH E1)

瓊氏不動(dòng)桿菌人多功能蛋白聚糖Bacillus sp.小鼠糖原合成激(GSK)

醋化醋桿菌人核因子/k基因結(jié)合核因子Bacillus sp.小鼠糖原合成激(GSK)

畢赤酵母人ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4Bacillus sp.小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)

三線鐮刀菌人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因Bacillus sp.小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)

圓弧青霉人孕和adipoQ受體家族成員ⅦBacillus sp.小鼠高敏狀腺原(u-T3)

綠色木霉人集蛋白亞家族成員11Bacillus sp.小鼠高敏狀腺原(u-T3)

玫瑰變紅鏈霉菌人絲蛋白抑制因子肽抑制因子進(jìn)化枝3GBacillus sp.小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)

癭青霉人血漿同型半胱Bacillus sp.小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)

嗜肉考克氏菌人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因Bacillus sp.小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)

小孢根霉華變種人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因Lysinibacillus sphaericus小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)

球孢白僵菌人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因Lysinibacillus sphaericus小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)

鋅指蛋白347抗體解鳥克雷伯氏菌人永生化表皮細(xì)胞

鋅指蛋白219抗體多主葡萄殼菌人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

EGF應(yīng)答因子1抗體抗體地毯草黃單胞菌花葉萬(wàn)年青致病變種人正常肝細(xì)胞

指蛋白36抗體黑鏈格孢人胚肺二倍體細(xì)胞
DGAT/COX-1和COX-2抑制劑(Xanthohumol)停滯棒桿 赤芝酸D

根瘤 溴甲紫鈉

雙孢蘑菇 溴甲紫

天鵝頸狀彎曲擔(dān)子酵母 靈芝烯酸E

金色鏈霉 羧基蒼術(shù)苷

吸水鏈霉吸水亞種 甲基紫6B

Amycolatopsis 甲基紫

酮丁梭 脫乙酰靈芝酸F

頭葡萄球解脲亞種 甲基橙

嗜糖黃桿 赤芝酸B

缺陷短波單胞桿 鹽酸丫黃

短芽孢桿屬 赤芝酸A

桔黃糖多孢 鹽酸丫啶

擬莖點(diǎn)霉屬 赤芝酸L

蠟狀芽孢桿 丫啶黃