PARP-1抑制劑(NMS-P118)

PARP-1抑制劑(NMS-P118)公司*的產(chǎn)品：Anti-NOS-2/iNOS /FITC 熒光素標(biāo)記一氧化氮合成酶-2抗體(誘導(dǎo)型)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-ZNF217/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白217抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
細(xì)胞凋亡敏感性基因 Anti-CAS 0.1ml
G

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PARP-1抑制劑(NMS-P118)

英文名稱：NMS-P118

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

果生鏈核盤菌Penicillium simplicissimum

蒂地盾殼霉Aspergillus aureolatus

黑曲霉Aspergillus auricomus

南印度站游動(dòng)球菌Talaromyces sp.

釀酒酵母Aspergillus avenaceus

栗疫菌Aspergillus clavatus

禾谷鐮刀菌Aspergillus awamori

高山節(jié)桿菌Aspergillus awamori

扁菌Aspergillus awamori

枯草芽孢桿菌Aspergillus awamori

光帽鱗傘Aspergillus awamori

小腸腸球菌Aspergillus awamori

大腸埃希氏菌Aspergillus awamori

高加索鏈霉菌Aspergillus awamori

木紫芝Aspergillus awamori

灰號(hào)角Aspergillus awamori

小鼠B因子(BF)免疫試劑盒BZW2蛋白抗體人輪狀病(RV)IgM 蒜

小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒緩激肽B1受體抗體人輪狀病(RV)IgM 穗花杉雙黃

小鼠B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒鈣激活通道蛋白α1抗體人艾柯病IgM(ECHO IgM)梭砂貝母堿;新貝甲

小鼠B活化因子(BAFF)免疫試劑盒卵黃狀黃斑病蛋白2抗體人艾柯病IgM(ECHO IgM)羧基蒼術(shù)苷
PARP-1抑制劑(NMS-P118)5HT1F Receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體1F抗體 0.2ml

phospho-ERK1 (Thr197 +Thr202) 英文名稱： 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗體 0.1ml

膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體β抗體 Anti-TmR2 0.2ml

Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記壞死因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-JunB(Ser259) 磷酸化活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml

PLGF (Placenta growth factor) 小鼠胎盤生長(zhǎng)因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)